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申请/专利权人：山东省海洋生物研究院

摘要：本发明公开了一种海黍子藻礁的人工接种方法，属于海藻保育及自然资源人工修复领域。本发明将藻礁表面进行特化处理，同时将收集的海黍子受精卵液与海藻酸钠溶液混合后制成黏着液，使黏着液具有一定的黏着能力，可提高受精卵在藻礁表面上的附着率，藻礁上涂布黏着液后，再覆上一层由聚乙烯醇制备的凝胶保护层即可完成藻礁接种。利用该技术方法能降低海藻受精卵及幼苗脱苗率，同时缩短藻礁接种过程，提高工作效率；黏着液及保护层材料无生物毒性，对海藻幼苗及环境生物无危害。

主权项：1.一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法具体包括以下步骤：（1）藻礁表面处理：藻礁制备时藻礁表面采用砂粒与水泥混合制成，礁体接种前需用砂滤海水浸润后，晾干表面水分备用；所述砂粒的粒径为0.5-0.7mm，水泥型号优选P.I42.5，砂粒与水泥的体积比为4:1；（2）受精卵液准备：采集成熟的海黍子藻体，选取生殖托上有受精卵挂托的海藻个体，放入采苗池中，采苗池中注入10-20cm深度的砂滤海水，搅动藻体刺激海藻放散受精卵4-8小时，用80目及200目筛绢过滤采苗池池水，收集200目筛绢上的海黍子受精卵，用砂滤海水冲洗两次后，置于一定体积的灭菌海水中，受精卵液终浓度为200-300粒ml，然后在受精卵液中滴加NaNO3及Na2HPO4，室温放置备用；所述NaNO3的终浓度为3.5mgml，Na2HPO4的终浓度为0.02mgml；（3）黏着液的配制：制备海藻酸钠溶液，加热溶解后冷却至30℃，再与受精卵液均匀混合后放置备用；所述海藻酸钠溶液的浓度为4%，与受精卵液的体积比为3：2；（4）保护液配置：配制聚乙烯醇溶液，加热溶解后冷却备用；（5）藻礁接种：将配置好的黏着液均匀涂抹于藻礁表面，再在藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液；30分钟后，在藻礁表面均匀涂抹一层保护液，然后再藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液，在阴凉通风处放置20分钟即完成藻礁接种。

全文数据：一种海黍子藻礁的人工接种方法技术领域本发明涉及一种海黍子藻礁的人工接种的技术方法，尤其是一种用于海黍子藻礁人工增殖的人工接种方法，属于海藻保育及自然资源人工修复领域。背景技术海黍子是中国沿海常见海藻种类，主要分布于潮下带1-4m。由于其常在水下聚集生长形成藻场，为小型无脊椎动物及近岸鱼类提供栖息、觅食、孵化场所，因此海黍子在近海具有重要生态价值。但是近年来随着自然海岸线的过度开发，海黍子自然资源受损严重，亟待人工养护和恢复。海黍子藻礁是人工补育海藻自然资源的重要手段，其中将海黍子幼体接种到藻礁是最为重要的技术环节之一。目前主要采用的方法是将收集的海黍子受精卵直接泼洒在藻礁上，在人工条件下待海黍子幼苗在藻礁上生长附着牢固才能完成藻礁接种过程。该技术过程存在耗时长、成本高、受精卵利用率较低等技术缺点。现有技术中海黍子藻礁人工接种存在以下技术缺陷：1）藻礁接种时间长。采用现有技术进行藻礁接种，在将海黍子受精卵泼洒在藻礁上后，需要经过一个幼苗生长固着阶段，当幼苗生长至一定大小时才能基本完成藻礁接种工作，一般来说这个过程需要5-15天；2）现有技术接种成本高。由于藻礁上的海黍子幼苗需要经过一个阶段的人工培育，在此期间为海黍子幼苗生长提供合适的光照、水流等条件，需要耗费一定的人力、物力资源，因此藻礁接种的成本相对较高；3）现有技术接种方法海黍子受精卵利用率较低。由于海黍子受精卵不具有鞭毛，无游动性，因此在流水培养阶段部分发育迟缓的幼苗会被从藻礁上冲脱，造成海黍子受精卵利用率低的问题。而为了避免出苗不均的情况，往往又会采用过量密度的海黍子受精卵进行接种操作，但藻礁上幼苗密度过高的区域在人工培育后期，幼苗个体偏小，藻礁投放海区后成苗率也较低，因而藻礁接种方式必然导致海黍子受精卵利用率低下。综上所述，现有技术中海黍子藻礁人工接种仍存在较大缺陷，严重制约了海黍子人工增殖效率，开发高效的海黍子藻礁人工接种方法具有重要意义，也是本领域亟待解决的技术难题。发明内容为克服现有技术中的上述缺陷，本发明提供一种海黍子藻礁的人工接种方法，其要解决的技术问题主要包括：1）避免海黍子人工培育过程中藻礁上的幼苗易被水流冲脱的风险；2）缩短藻礁接种时间；3）省去海黍子幼苗人工培育阶段，降低接种成本；4）避免藻礁投放初期杂藻生长，提高接种海黍子的成苗率。本发明通过下述技术方案实现上述技术目的：本发明提供一种海黍子藻礁的人工接种方法，将藻礁表面进行特化处理，同时将收集的海黍子受精卵液与海藻酸钠溶液混合后制成黏着液，使黏着液具有一定的黏着能力，可辅助尚未萌发的海黍子受精卵固着在藻礁表面，藻礁上涂布黏着液后，再覆上一层由聚乙烯醇制备的凝胶保护层，即可完成藻礁接种。利用该技术方法能降低海藻受精卵及幼苗脱苗率，同时缩短藻礁接种过程，提高工作效率；黏着液及保护层材料无生物毒性，对海藻幼苗及环境生物无危害。上述海黍子藻礁的人工接种方法，具体包括以下步骤：（1）藻礁表面处理：藻礁制备时藻礁表面采用砂粒与水泥混合制成，礁体接种前需用砂滤海水浸润后，晾干表面水分备用；（2）受精卵液准备：采集成熟的海黍子藻体，选取生殖托上有受精卵挂托的海藻个体，放入采苗池中，采苗池中注入10-20cm深度的砂滤海水，搅动藻体刺激海藻放散受精卵4-8小时，用80目及200目筛绢过滤采苗池池水，收集200目筛绢上的海黍子受精卵，用砂滤海水冲洗两次后，置于一定体积的灭菌海水中，受精卵液终浓度为200-300粒ml，然后在受精卵液中滴加NaNO3及Na2HPO4，室温放置备用；（3）黏着液的配制：制备海藻酸钠溶液，加热溶解后冷却至30℃，再与受精卵液均匀混合后放置备用；（4）保护液配置：配制聚乙烯醇溶液，加热溶解后冷却备用；（5）藻礁接种：将配置好的黏着液均匀涂抹于藻礁表面，再在藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液；30分钟后，在藻礁表面均匀涂抹一层保护液，然后再藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液，在阴凉通风处放置20分钟即完成藻礁接种。优选的，步骤（1）中砂粒的粒径为0.5-0.7mm，水泥型号优选P.I42.5，砂粒与水泥的体积比为4:1。优选的，步骤（2）中NaNO3的终浓度为3.5mgml，Na2HPO4的终浓度为0.02mgml。优选的，步骤（3）中海藻酸钠溶液的浓度为4%，与受精卵液的体积比为3：2。优选的，步骤（4）中聚乙烯醇溶液的浓度为9%。优选的，步骤（5）中黏着液涂抹厚度为0.5-1.0mm。优选的，步骤（5）中第一次喷洒的CaCl2溶液浓度为3%，并在4℃条件下进行预冷处理；第二次喷洒的CaCl2溶液为饱和CaCl2溶液，并在4℃条件下进行预冷处理。优选的，步骤（5）中保护液的涂抹厚度为0.5-1.0mm。本发明与现有技术相比具有如下有益技术效果：1.提供了一种藻礁接种的新方法。现有方法为将海藻受精卵泼洒在藻礁上，然后车间培育藻礁幼苗至一定大小后再投放海区。本发明通过在藻礁表面涂布两层凝胶层起到迅速在藻礁上固定海藻幼体功能，其中黏着液发挥固定海藻受精卵功能；保护液发挥强化凝胶保护层作用，保护海藻受精卵萌发期（幼体固着力较低）抵御水流冲击。此外，还在受精卵液中添加了适量的营养盐（NaNO3、Na2HPO4）以促进海藻幼体生长；2.所述方法绿色无危害。本发明使用的试剂无生物毒性，不会对海藻幼体及环境产生危害，此外藻礁表面的凝胶层为易降解材料，随着藻礁上海藻幼苗的生长，凝胶层会逐渐脱落，海藻依靠其自身的固着器即可牢固附着在藻礁上；3.缩短了海黍子藻礁接种时间。采用本发明技术手段，将收集的海黍子受精卵液制成黏着液后均匀涂抹在藻礁表面，然后再涂抹保护液，待礁体表面液体固化后即完成藻礁接种，该过程4-8小时即可完成藻礁接种，将接种效率提高15倍以上；4.省去了海黍子幼苗人工培育阶段，降低接种成本。采用本发明技术方法，待藻礁上黏着液固化后即完成接种，免去了车间培育过程中的人力物力消耗，因此降低了藻礁接种成本；5.提高了受精卵利用率。本发明的藻礁黏着液固化后，能将海黍子受精卵固定在藻礁表面并对水流冲击具有一定的抵抗力，能够帮助幼苗降低被冲脱的风险，从而提高海黍子受精卵利用率；6.避免了藻礁投放初期杂藻生长。由于藻礁表面具有凝胶保护层，因此在藻礁投放初期，杂藻很难在藻礁上有效附着。待藻礁上接种海藻幼苗生长到一定大小后，其在藻礁上已形成优势种，此时虽然凝胶层在浪流作用下降解脱落，但杂藻也很难再在藻礁上形成优势群落；因此本发明方法能在藻礁上抑制杂藻生长，提高接种海藻的成苗率；7.提高了接种效率。本发明针对海黍子等马尾藻科海藻受精卵的特点，优化藻礁接种流程，主要包括：藻礁表面粗糙度、受精卵液浓度及营养盐（NaNO3、Na2HPO4）浓度、凝胶剂（海藻酸钠、聚乙烯醇）的浓度、交联剂（CaCl2）的浓度等。采用本发明方法的技术参数能获得较高藻礁海藻成苗率；试验结果表明对上述技术参数进行调整，尽管可以实现藻礁接种效果，但接种率显著降低（P0.01）。具体实施方式以下结合具体实施例进一步描述本发明，但所述实施例并不以任何方式限定专利保护的范围。一种海黍子藻礁的人工接种方法，具体包括如下步骤：1）藻礁表面处理：藻礁制备时藻礁表面采用粒径0.5-0.7mm的砂粒与水泥（型号P.I42.5）以体积比4:1混合制成。礁体接种前需用砂滤海水浸润后，晾干表面水分备用；2）受精卵液准备：采集成熟的海黍子藻体，选取生殖托上有受精卵挂托的海藻个体，放入采苗池中，采苗池中注入10-20cm深度的砂滤海水，搅动藻体刺激海藻放散受精卵4-8小时，用80目及200目筛绢过滤采苗池池水，收集200目筛绢上的海黍子受精卵，用砂滤海水冲洗两次后，置于一定体积的灭菌海水中，受精卵液终浓度为200-300粒ml，然后在受精卵液中滴加终浓度3.5mgml的NaNO3及0.02mgml的Na2HPO4，室温放置备用；3）黏着液的配制：制备4%的海藻酸钠溶液，加热溶解后冷却至30℃，再以3：2体积比与受精卵液均匀混合后放置备用；4）保护液配置：配制9%的聚乙烯醇溶液，加热溶解后冷却备用；5）藻礁接种：将配置好的黏着液，以0.5-1.0mm厚度均匀涂抹于藻礁表面，再在藻礁表面轻轻喷洒一层4℃预冷的3%浓度的CaCl2溶液。30分钟后，在藻礁表面以0.5-1.0mm厚度均匀涂抹一层保护液，然后再藻礁表面轻轻喷洒一层4℃预冷的饱和CaCl2溶液，在阴凉通风处放置20分钟即完成藻礁接种。以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

权利要求：1.一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法具体包括以下步骤：（1）藻礁表面处理：藻礁制备时藻礁表面采用砂粒与水泥混合制成，礁体接种前需用砂滤海水浸润后，晾干表面水分备用；（2）受精卵液准备：采集成熟的海黍子藻体，选取生殖托上有受精卵挂托的海藻个体，放入采苗池中，采苗池中注入10-20cm深度的砂滤海水，搅动藻体刺激海藻放散受精卵4-8小时，用80目及200目筛绢过滤采苗池池水，收集200目筛绢上的海黍子受精卵，用砂滤海水冲洗两次后，置于一定体积的灭菌海水中，受精卵液终浓度为200-300粒ml，然后在受精卵液中滴加NaNO3及Na2HPO4，室温放置备用；（3）黏着液的配制：制备海藻酸钠溶液，加热溶解后冷却至30℃，再与受精卵液均匀混合后放置备用；（4）保护液配置：配制聚乙烯醇溶液，加热溶解后冷却备用；（5）藻礁接种：将配置好的黏着液均匀涂抹于藻礁表面，再在藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液；30分钟后，在藻礁表面均匀涂抹一层保护液，然后再藻礁表面轻轻喷洒一层CaCl2溶液，在阴凉通风处放置20分钟即完成藻礁接种。2.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（1）中砂粒的粒径为0.5-0.7mm，水泥型号优选P.I42.5，砂粒与水泥的体积比为4:1。3.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（2）中NaNO3的终浓度为3.5mgml，Na2HPO4的终浓度为0.02mgml。4.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（3）中海藻酸钠溶液的浓度为4%，与受精卵液的体积比为3：2。5.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（4）中聚乙烯醇溶液的浓度为9%。6.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（5）中黏着液涂抹厚度为0.5-1.0mm。7.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（5）中第一次喷洒的CaCl2溶液浓度为3%，并在4℃条件下进行预冷处理；第二次喷洒的CaCl2溶液为饱和CaCl2溶液，并在4℃条件下进行预冷处理。8.根据权利要求1所述的一种海黍子藻礁的人工接种方法，其特征在于所述接种方法步骤（5）中保护液的涂抹厚度为0.5-1.0mm。

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