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申请/专利权人：吉林农业大学
摘要：一种GV期卵母细胞的冷冻保存及解冻方法，属于卵母细胞冷冻技术领域。为了解决玻璃化冷冻法冷冻保存GV期卵母细胞存在的冷冻解冻后卵母细胞细胞器受到冷冻损伤而导致受精卵裂率、囊胚发育率低的问题，本发明采用cryoloop为载体对GV期卵母细胞进行冷冻保存，以冷冻基础液为基质，以DMSO和乙二醇为冷冻保护剂，冷冻、解冻过程中添加原花青素，解决了现有卵母细胞冷冻保存解冻后存活率及发育率低的问题。本发明提供的GV期卵母细胞的冷冻保存及解冻方法能够提高GV期卵母细胞冷冻保存效率，而且成本低廉，便于广泛推广，适用于哺乳动物或人的GV期卵母细胞的冷冻保存。
主权项：1.一种GV期卵母细胞的冷冻保存方法，其特征在于，将GV期卵母细胞在平衡液中平衡3分钟，然后转移到冷冻保存液中，再立即转移到冷冻环上，并迅速投入液氮中冷冻；所述平衡液由冷冻基础液、原花青素、乙二醇、二甲基亚砜组成；原花青素的浓度为100-200μM，乙二醇的体积浓度为7.5％，二甲基亚砜的体积浓度为7.5％；所述冷冻保存液由冷冻基础液、蔗糖、原花青素、乙二醇和二甲基亚砜组成；原花青素的浓度为100-200μM，乙二醇的体积浓度为15％，二甲基亚砜的体积浓度为15％，蔗糖的浓度0.5M；所述冷冻基础液由培养液和胎牛血清组成；所述培养液为DMEM培养液、TCM199培养液、M16培养液和MEM培养液中的任意一种，所述胎牛血清的添加量为20％vv。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林农业大学 一种GV期卵母细胞的冷冻保存及解冻方法
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