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申请/专利权人：湖北大学
摘要：本发明公开了一种基于CL7‑CVN和Im7系统分离、富集和检测囊膜病毒的方法，包括以下步骤：先制备重组CL7‑CVN蛋白和Im7蛋白；将Im7蛋白与微球偶联得到微球Im7‑Beads；先向待富集病毒样品中投入重组CL7‑CVN蛋白，孵育后，再投入Im7‑Beads，孵育后富集，离心得到富集病毒的Im7‑Beads；提取所述Im7‑Beads富集的囊膜病毒核酸，RT‑PCR检测并计算富集效率。本发明通过基因工程的方法制备了CL7‑CVN蛋白，并利用CL7与Im7的特异性结合、及CVN结合囊膜病毒的性能，能够将PRV病毒颗粒富集至Im7‑Beads表面，为病毒分离富集和其检测提供一种全新的技术手段。
主权项：1.一种基于CL7-CVN和Im7系统分离和富集囊膜病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将CL7-CVN的表达载体转化至第一宿主细胞中，诱导表达，纯化后得到重组CL7-CVN蛋白；（2）将Im7的表达载体转化至第二宿主细胞中，诱导表达，纯化后得到Im7蛋白；（3）将Im7蛋白与微球偶联反应，得到Im7-Beads微球；（4）将待分离富集的囊膜病毒样品、重组CL7-CVN蛋白溶液及Im7-Beads混合后，孵育，离心得到富集囊膜病毒的Im7-Beads微球；其中所述步骤3具体为：S1：菊糖配制成溶液，加入六偏磷酸钠，充分搅拌溶解；再向体系中滴加碳酸钠溶液反应，反应结束后，离心得到沉淀，沉淀洗涤分散后得到Beads分散液；S2：取乳化剂作为油相液，将所述步骤2得到的纯化的Im7蛋白、及Beads分散液分别逐滴加入上述油相液中，乳化后得到初步乳液；再将原花青素溶液逐滴加至所述初步乳液中，搅拌反应，反应结束后离心收集沉淀，洗涤后，得到Im7-Beads微球，于Na3N保存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖北大学 基于CL7-CVN和Im7系统分离、富集和检测囊膜病毒的方法
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