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申请/专利权人：中国科学院西北高原生物研究所

摘要：本发明涉及一种青藏扁蓿豆EST‑SSR遗传标记位点，该EST‑SSR遗传标记位点是指通过青藏扁蓿豆幼苗转录组测序获得转录本，对转录本中SSR位点检测后，根据转录本上SSR位点侧翼序列设计的如序列表中SEQIDNO.1~700位所示的引物核苷酸序列。其引物序列在青藏扁蓿豆和扁蓿豆基因组DNA中的扩增产物长度，为相同和接近如序列表中SEQIDNO.1~700位所示的引物的预期扩增产物碱基序列长度。本发明青藏扁蓿豆EST‑SSR遗传标记位点可应用于青藏扁蓿豆和扁蓿豆种质资源商业性遗传多样性评价方面、青藏扁蓿豆和扁蓿豆商业化品种选育中以及青藏扁蓿豆和扁蓿豆功能基因商业化鉴定开发中。

主权项：1.青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记引物，其特征在于：该EST-SSR遗传标记引物是指通过青藏扁蓿豆幼苗转录组测序获得转录本，对转录本中SSR位点检测后，根据转录本上SSR位点侧翼序列设计的如序列表中SEQIDNO.1~700所示的引物。

全文数据：青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点和相应标记引物序列及其应用技术领域本发明涉及生物技术领域，尤其涉及青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点和相应标记引物序列及其应用。背景技术青藏扁蓿豆Medicagoarchiducis-nicolaiSirjaev和扁蓿豆MedicagoruthenicaL.Ledebour属于苜蓿属Medicago矩荚苜蓿组Platycarpae，对极端环境如干旱、寒冷以及盐碱具有极强的适应性。其中青藏扁蓿豆分布于青藏高原，是苜蓿属中在青藏高原高寒天然草地上唯一能够越冬的物种。扁蓿豆广泛分布于北半球高纬度高寒地区。由于对严酷自然环境的良好适应性，扁蓿豆被认为是在包括紫花苜蓿在内的苜蓿属栽培种无法正常安全越冬的地区具有驯化种植利用潜力的苜蓿属优良豆科牧草遗传资源。相对于扁蓿豆，青藏扁蓿豆生长于自然环境更为复杂严酷的青藏高原高海拔地区，因而对极端非生物胁迫环境具有更强的适应性。利用简单重复序列（singlesequencerepeat,SSR）等分子遗传标记开展上述两个苜蓿属种植资源的遗传多样性评价，鉴定与极端环境适应关联的遗传位点，开发和利用与极端逆境耐受性相关的功能基因，对于其在高寒牧业区草场人工驯化利用、新品种选育，以及苜蓿属其它栽培种的抗逆性改良具有重要的应用前景。SSR序列是基因组中以1-6bp的DNA碱基为重复单元的分布于编码区或非编码区的的串联重复序列。作为常用的分子遗传标记方法，SSR标记普遍运用于分子遗传图谱构建、辅助标记遗传育种以及遗传多样性评价等领域。传统的基于基因组序列的SSR标记开发，对于尚无基因组序列信息的生物物种，其开发成本高而且费时。通过对数量不断增加的序列表达标签Expressedsequencetag数据挖掘获得的基于转录本序列的EST-SSR开发则是一条高效低成本的途径。同时EST-SSR标记在属内物种间高效率转移特性，为尚缺少可用EST序列数据的物种的EST-SSR标记开发提供了捷径。但是，相对于基因组中变异较大的基因间隔区，转录区核苷酸序列具有较高的物种间保守型，在属内亲缘关系较远的物种间具有可转移性的EST-SSR标记的多态性往往较低。因此，开发针对特定物种的EST-SSR标记，对于鉴定高密度的多态性遗传位点用于物种遗传多样性评价、目标性状精细定位以及分子标记辅助育种极为重要。新一代高通量测序技术的兴起和和成熟，以及成本的不断下降，为特定物种的EST-SSR标记开发提供了条件。发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种青藏扁蓿豆的EST-SSR遗传标记位点。本发明所要解决的另一个技术问题是提供该青藏扁蓿豆的EST-SSR遗传标记位点的相应标记引物序列。本发明所要解决的第三个技术问题是提供基于青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点及其相应标记引物序列在青藏扁蓿豆和扁蓿豆种质资源商业性遗传多样性评价、青藏扁蓿豆和扁蓿豆商业化品种选育、青藏扁蓿豆和扁蓿豆功能基因商业化鉴定开发中的应用。为解决上述问题，本发明所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点，其特征在于：该ESR-SSR遗传标记位点是指通过青藏扁蓿豆幼苗转录组测序获得转录本，对转录本中SSR位点检测后，根据转录本上SSR位点侧翼序列设计的如序列表中Man1~Man350所示的引物核苷酸序列。所述EST-SSR遗传标记位点的引物序列在青藏扁蓿豆和扁蓿豆基因组DNA中的扩增产物长度，为相同和接近如序列表中Man1~Man350所示的引物的预期扩增产物碱基序列长度。如上所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆种质资源商业性遗传多样性评价方面的应用。如上所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆商业化品种选育中的应用。如上所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆功能基因商业化鉴定开发中的应用。本发明与现有技术相比具有以下优点：1、本发明通过对青藏扁蓿豆低温胁迫处理和非低温胁迫对照幼苗的转录组测序分析，获得了99635条代表性转录本序列，从中鉴定出了3253个潜在的SSR位点。在此基础上，设计了3080对涉及2829条转录本的EST-SSR引物。从上述3080对引物中随机挑选合成477对引物，在青藏扁蓿豆基因组中扩增获得了350对具有与预期分子量接近的引物。该350对引物在扁蓿豆基因组中扩增发现346对引物能够扩增出与预期分子量相近的条带。对上述350对EST-SSR引物在青藏扁蓿豆和扁蓿豆中的多态性检测表明，164对和114对引物分别在青藏扁蓿豆和扁蓿豆种内个体间存在多态性，另外有44对在上述两个种内个体间不存在多态性的引物存在上述两个种间的多态性，最后获得了229对具有种内或种间多态性的引物。因此，上述EST-SSR标记及其引物序列可用于青藏扁蓿豆和扁蓿豆种质资源商业性遗传多样性评价、商业化品种选育和青藏扁蓿豆和扁蓿豆功能基因商业化鉴定开发中的应用。2、本发明中利用青藏扁蓿豆和扁蓿豆两个物种中具有种内或种间多态性的75对EST-SSR引物，对3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆野生群体中共计94个个体的基因型鉴定，发现不同EST-SSR位点间的遗传参数具有明显的差异。3、本发明中将用于野生群体检测的75对引物中不存在偏离哈迪-维尔伯格平且不存在明显的位点间遗传连锁的64对引物，对3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆野生群体的遗传多样性分析表明，上述6个野生群体存在一定程度的遗传多样性。4、通过利用本发明64对引物在3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆群体中共计94个个体基因型检测结果的群体遗传结构分析和群体间遗传分化分析比较发现，上述引物可以有效地将上述6个群体聚类到预期的青藏扁蓿豆和扁蓿豆两个物种中，属于不同物种的群体间的遗传分化程度明显高于群体内物种间的遗传分化程度。此外，群体内物种间的遗传分化程度与地理距离存在明显的相关性。附图说明下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。图1为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的64个EST-SSR位点引物在6个群体中检测群体遗传结构。图2为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的64个EST-SSR位点的引物在6个群体中检测的群体遗传结构最优分组评价，显示6个群体的最优分组为2组。图3为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的64个EST-SSR位点的引物在6个群体中检测的群体主成分分组。图4为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的64个EST-SSR位点的引物在6个群体中检测的群体遗传距离分组。具体实施方式实施例1青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点，该ESR-SSR遗传标记位点是指通过青藏扁蓿豆幼苗转录组测序获得转录本，对转录本中SSR位点检测后，根据转录本上SSR位点侧翼序列设计的如序列表中Man1~Man350所示的引物核苷酸序列。其引物序列在青藏扁蓿豆和扁蓿豆基因组DNA中的扩增产物长度，为相同和接近如序列表中Man1~Man350所示的引物的预期扩增产物碱基序列长度。一、青藏扁蓿豆SSR位点的获得。1、青藏扁蓿豆植株低温胁迫处理与转录组测序：⑴扁蓿豆植株培养与低温胁迫处理：从青海省同德县巴滩天然草地采集青藏扁蓿豆植株，将来自同一个植株的分枝分离，21℃、16h8h光周期条件下进行无性繁殖扩繁后，转移至-4℃光照培养箱进行低温处理24h，在低温处理前和处理后取地上部分液氮速冻，-80℃保存。⑵转录组测序：将低温处理前和处理后的样品，送诺和基因有限公司进行总RNA提取和Illumina测序。Illumina测序获得的rawread经过过滤过滤后，将处理前和处理后样品clearreads合并进行转录本组装，从组装获得的每个基因转录本组中选取最长的转录本作为代表性转录本序列。最终获得了99635条代表性转录本序列。2、SSR标记位点鉴定和引物设计：对转录组测序获得的转录本利用MISAMicroSAtellite程序http:pgrc.ipk-gatersleben.demisamisa.html进行SSR位点鉴定。参数设置为单碱基、二碱基、三碱基、四碱基、五碱基、六碱基重复单元的最小重复次数分别不低于12、6、6、5、5和4次，且获得的上述SSR位点侧翼序列长度150bp以上。对鉴定出含有上述条件的SSR位点的转录本，用Primer3软件http:sourceforge.netprojectsprimer3批量设计引物，引物设计参数设定为引物长度18~28nt，23nt为最优；扩增产物长度100~300bp；退火温度55~65℃，60℃为最优。最终从99635条代表性转录本中鉴定出了3253个潜在的SSR位点。在此基础上，设计了3080对涉及2829条转录本的EST-SSR引物。3、青藏扁蓿豆EST-SSR的验证、跨物种转移和多态性鉴定：从表1所列青海西宁西山和青海湟中西堡两地分别采集青藏扁蓿豆和扁蓿豆群体样品，分单株个体提取基因组DNA，将每个群体中来自5个个体植株的DNA等量混合为模板，从设计的EST-SSR引物中随机取477对引物，进行PCR扩增。表1青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体来源PCR反应体系由2μL10×PCRBuffer、1.6μLdNTP、0.4μL正向引物10μM、0.4μL反向引物10μM、0.1μLrTaqDNA聚合酶（Takara产品）、1μLDNA模板，并用ddH2O（双蒸水）加至终体积为20μL。其中：10×PCRBuffer为与rTaqDNA聚合酶配套缓冲液。dNTP由dATP（三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸）、dTTP（脱氧胸苷三磷酸）、dGTP（脱氧鸟苷三磷酸三钠）和dCTP（脱氧胞苷三磷酸）组成；dATP、dTTP、dGTP和dCTP均为2.5mM。PCR反应体系按下列程序进行：反应结束后，用质量浓度为0.7%的琼脂糖凝胶检测PCR产物。如表2所列350对引物，如表3所示能够在青藏扁蓿豆中扩增出与预期分量相近的条带；该350对在青藏扁蓿豆中能够成功扩增的引物中，有如表3所列的347对引物能够在扁蓿豆中获得与预期相符的扩增条带。表2为本发明青藏扁蓿豆350个EST-SSR标记的类型、引物序列及其扩增产物的预期分子量注：编号中的Man*是指青藏扁蓿豆的缩写及第*引物编号。而后对琼脂糖凝胶检测具有扩增条带且条带分子量与预期分子量接近的PCR产物进行6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测多态性。如表3所列，青藏扁蓿豆中能够成功扩增的350对引物中有165对引物的扩增条带存在多态性，扁蓿豆中能够成功扩增的347对引物中有114对引物的扩增条带存在多态性，另外44对不存在种内多态性的引物的扩增产物在上述两个物种间从在多态性。如表3所示，共计有229对引物的扩增产物从在种内或种间多态性。表3为本发明青藏扁蓿豆350对EST-SSR标记引物在青藏扁蓿豆和扁蓿豆中扩增确认和扩增产物的多态性实施例2青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点及其引物序列，来源于青藏扁蓿豆，它具有附表1所列的标记位点特点和核苷酸序列，应用于扁蓿豆和青藏扁蓿豆群体遗传多样性、群体遗传结构和遗传分化检测分析。1、青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体中个体的STR遗传分型将表2所列来自3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆野生群体的共计94个个体分别提取DNA为模板，从实施例1获得的验证的具有多态性的引物中取如表4所列编号和表1引物序列相对应的75对引物，对其反向引物5’端用HEX，6-FAM或TAMARA荧光基团标记，进行PCR扩增，扩增条件如实施例1所述。对扩增产物用ABI3130测序仪进行毛细管电泳，用GeneMapper2.2.0程序读取和计算扩增条带分子量。在上述75个EST-SSR位点上共检测到如表4所列的578个等位变异，各位点的等位基因数目范围为2-25个，平均每个位点的等位基因数目为7.71个。表4为本发明青藏扁蓿豆350对引物中75对引物在6个野生群体中检测的位点遗传参数“*”和“**”分别示Bonferroni校正P在0.05和0.01水平显著偏离哈迪-温伯格平衡；LD列显示存在明显遗传连锁的位点（Bonferroni校正P在0.05和0.01水平分别用“*”和“**”标示）。2、EST-SSR遗传标记位点位点的遗传参数分析对如上所述表4所列75对引物在6个群体中共计94个个体的遗传分型条带数据，用FSTAT2.9.3.2程序http:www2.unil.chpopgensoftwaresfstat.html计算每个位点的等位基因数目NA、位点丰富度AR、群体间遗传分化系数FST,个体相对于所有群体的近交系数FIT和个体相对于亚群体的近交系数。用Cervus3.0程序计算每个位点的多态性信息含量。同时用GenALExv.6.41程序计算各位点的观察杂合度HO、期望杂合度HE和固定系数F.用GENEPOP4.2程序检验各位点在每个群体内的哈迪-温伯格平衡，和个为点检在所有群体内的遗传连锁不平衡，并对检验P值进行Bonferroni矫正。统计获得的各个位点的遗传参数、哈迪-温伯格平衡和遗传连锁不平衡检测结果如表4所列。3、青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点对青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体的遗传多样性评价：利用如上所述75个EST-SSR扩增位点经过哈迪-温伯格检验和连锁不平衡检验获得的64个独立遗传的不存在相互遗传连锁位点，用GenALExv.6.41程序对3个青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体计算观察杂合度HO、期望杂合度HE和固定系数F，依此评价群体遗传多样性。如表5所列，6个群体的观察杂合度和期望杂合度分别为0.437~0.487和0.428~0.528，固定系数为0.010，不存在明显的近交。表5为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的4个EST-SSR位点的引物在6个群体中检测获得的群体遗传多样性参数4、青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点对青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体的群体遗传结构分析：利用如上所述75个EST-SSR扩增位点经过哈迪-温伯格检验和连锁不平衡检验获得的64个独立遗传的不存在相互遗传连锁位点，用STRUCTURE2.3.4程序、GENALEX6.4.3和POWERMARKER程序对3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆野生群体的遗传结构进行分析，如图1~4所示，6个群体被归为两个预期的物种，但扁蓿豆群体中存在一定程度的青藏扁蓿豆的基因渗入，同一物种内地理距离较远的群体间的存在较远的遗传距离。5、青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点对青藏扁蓿豆和扁蓿豆野生群体的群体遗传分化分析：利用如上所述的64个独立遗传且不存在相互遗传连锁的位点，运用FSTAT程序对上述3个青藏扁蓿豆和3个扁蓿豆野生群体间的遗传分化进行了分析，如表6所示，属于不同种的群体间的遗传分化系数高于种内群体间的分化系数，种内群体间的遗传分化系数随着地理距离的增加为增加。表6为本发明青藏扁蓿豆独立遗传且符合哈迪-温伯格平衡的60个EST-SSR位点的引物在6个群体中检测的群体间遗传分化系数“*”和“**”分别标示群体遗传分化系数在检验显著性P中国科学院西北高原生物研究所青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点和相应标记引物序列及其应用1050SIPOSequenceListing1.0123,23DNA1AATTGCACATTGTCCACTCAACCATGATGGGTGTCTTATGCTTGGT223,23DNA2GGAAGGTTGAGGGTCAAAATTGGTGGGAGTGGTAAATCAGGTGTTT323,23DNA3CAACCCTGGCTAAGATGAGATCATGCTCATATCTTCGTGGCCAATA423,23DNA4CTGAAAACCCACCTCAAAACTCCGTCGTTTTTGCGGGTTTTAGAGA523,23DNA5AAGTGTCCTTGGCAATGTCAATGGGGGGAGTTGGAAAAGATTTTGG623,23DNA6TAGTGGCATGCTTCCTGAGATACAGCCATAAGCCCAATATCCAACA723,23DNA7CCCATTTCAAAACGCACAAGTTGTTGAGACTGTGGGGTCTAATGTG823,23DNA8ATCGACTTGATCTTGAGGAGCTCGGTGTTCAAGTTGCTTCTGAGTC923,23DNA9ATACCCTGTTCCTGTTCCTGTTCGCGGAACTGGAGATGGAGATAAT1023,23DNA10GCCCTGTAGGTCTTAGGTTTGAACAAAATCATCACCGACCAAACCA1123,23DNA11GGGTGCAGTTGAGGAGAGATAAAAGAGTGGGCAGAGTCATCAAATT1223,23DNA12CCAAGATCCTCAGGTGTTGATGACCGAGAACCAAGGAAGAAAAACC1323,23DNA13GTGGATGGATTTTGTGCTGTGAATCAACCAACAAAAGAACAGAGGT1423,23DNA14TTAGGAGCAGTTACAGGCAGTTTTCTGTAATCCCAGAGCAAAAGCT1523,23DNA15TGTGGCCACTGAATCATTTCCTAGTGACAAACTCACCATTGCTTCA1623,23DNA16TACACCTGTCTCACCTTCTCTCTAAATAACCGACCTTTTATGCCGC1723,23DNA17ATGACCCTCATAACCCTCAACACGATGATGAAACTCCGATCCGAGA1823,23DNA18CGGACAAGAGCAGCATACTCATAGGAGACAGAGGCAAACACCTTAT1923,24DNA19TTCCTGTCTTTGCTCAGAGACTCACATCCATCACAGTGTATGTTCAC2023,23DNA20CGACCCCTATGCACAAATGTAAAGTGGCAAAAAGGGGAAGTTCTAC2123,23DNA21ACACAAAAGGGGAAGAGGGAATTTTTCTCCAGTTTTGTTCGTCAGC2223,23DNA22TGTCTTCCTGATTGTGTTGCATGCGAAGAACCACCACCATTACATG2324,23DNA23ACTAGCCGATTAACAGTGTCAAGTACTGTGTGTTTCGGAGGTTGTAT2423,23DNA24GCCAAGCAAACCAACTAAAAAGCGTTCTGGAAAGCTACGGTGGATA2523,23DNA25TTTCACAGTTATCAACAACCGCCTGCAATCTGCCGTTATCATGTTC2623,23DNA26CCTTCTTTTGTCCTGTCCTACGACGGGTTGCCGTTACTATTTTGTT2723,23DNA27AACAACAACAGCAACAAAGTCCAAAGACGTTCCCTTCTTCTAGCAG2823,23DNA28GAAGATTGGTGGCCATGTTTTCATAAGCTGAACCTCCAAGTAACCC2923,23DNA29AATGGTGAAAATGGGAAGCTTGGATGCGCTTACGGAAATAATTGCT3023,23DNA30ACAACTATTGTGGTTCAAACCCCAATCCCATGCTCTACAGTTTGGT3123,23DNA31TTCTTGTCCCCTCCCTTCAAAAACGGTTAATTTTGCTGAACCACCA3223,23DNA32GGAGGTTGATGAAGAAGAGCAGAGTTCACCAGAAACGATCACTTCA3323,23DNA33AGGTGAGTGAAGTTTTTGCTTGAACAGATTGAATCCTAACACCCCA3423,23DNA34TAAGTTTCCAAGCTCCAGTCCTCTCTGTAGCTGCTGAGTCATTTGT3523,23DNA35CATATACTGAGGATTGGGCGGAACCAGATGTTCGAGGTAACCAGAA3623,23DNA36AGTTGTAGCCCCTGTTGTTATCATCTTAACCGAAGAGTGCATGGAA3723,23DNA37TTGTCAAATAAATCAGCCACGGCTACTCCAAACATCACTAAGGGCC3823,23DNA38AACTGCTTCCTTCTAGCCATACCCTCACTTATCAGCATGAACACGC3923,23DNA39CAACGTCTTTGCAACTACGGATTTTCTTAAGTGAGGATGTGACGGT4023,23DNA40ATGCGACGGAATAAACTAGACCAGAGAGCAAGAGTAGCTCTGTGTC4123,23DNA41TCGATGTTGAGGAGGTTGTTGATATCTCACCCCAATTCACCTTCTC4223,23DNA42AATTTGGTTGTTGCAGTTCCACAGCTTCTCCAATCCATCATCGTTG4323,23DNA43GAAGGGAGATCTGTGTGTCTTGTTCACCGGAATCACCATTTCTCTT4423,23DNA44CCAAACACAAAAAGACCAACCCACTTCTTGCATGTCGTGTTCTGTT4523,23DNA45TGTACACCCGTAACCAATCCAATAAGCTAATTTCCCACTCGTCACT4623,23DNA46TTGAAGGGTGGTTAGGAATGAGGATTTTGGAAGGAAAGTTGCAGCA4723,23DNA47GGTTGCGAAAAGGAAAGGAAGAGATTACAGTTGCCCATACAGGAGG4823,23DNA48GCCTTGGGTCTTAATGGCAAATTTGCTTGGCTTTAATGTGGGAATG4923,23DNA49AGGATTAGCCATTCCCACCAAATGAGTGCTGGGGAGTTATCCTATG5023,23DNA50TAACCATACTCTCTGGACCCCTTCCACAAACATTGCTTTCTCGAGT5123,23DNA51CCGTTGAGGTTAAGGTTCATCCTCAAGCCATGGAAACCATTGCTTA5223,23DNA52AGAAGCACTCATAGGTCACAACCATGCAATTGGGAGGTTAGACAGT5323,23DNA53GTGGTAGTGGTGGCAGTACTAAAAGCTGTGAGGATTTACTTGAGGG5423,23DNA54AGATTCCACCCAAATGCTGTTTGGCCAAAGCATTCTCAAAGAGCTT5523,23DNA55CTTTCCCTTTTCTTTGTTGCCCAAGGTTCAACTTATGCATAGCCCA5623,23DNA56GCCATATTCAGGTTGGTTTACACCACTGGTGCAAAGCTATGTGTAGA5723,23DNA57GGTTTCTGTGACGACTCTCTCTTTGAATTGAAAGTGATGGTGACGG5823,23DNA58TGAAAGGGATGGAGGTTTCGATTCACTCACACACACACCCCTATAT5923,23DNA59ACGGTGGAACTTAAATTGTTGAAAACGTTCATCACACCGTTCATTC6023,23DNA60AGTTTAACTCGTTTGTGCTGGTGATCGTGTGCACAAATTCGTTGAT6123,23DNA61ATCCTCCTTAATCTCTTGGTGGTTGTAGCTTGGAAGTTGGAACTCT6223,23DNA62CGTCCTCATCGTCATCATCTTCTGGATCCATAACCACCCTATGCTT6323,23DNA63CATTTTAACGCAAACTGCAGCAGATTCAAAACCACCCCAAACAGAC6423,23DNA64GCAGCAACATCAAGTACCAATGTAGCTATTCATGCCTTCAGGGAAA6523,25DNA65AGAGTTGAAGAAGGCAGTGGAATAGGACTACCTAGCTAGTGATTAGGT6623,23DNA66ACCCACTATGAACTTGGCTTCATGCCAAACATCAACCGAAACAAAC6723,23DNA67TTCTGATCCATCGGTGTTGAGTTTCCATCGGAAATCTCAGTTACCG6823,23DNA68GCCCTAATCCAGCTCCTTGATTAGCTGTTGATGGTCCTAAGGGTTA6923,23DNA69TGAAGAATACAACGTGGTAGCCATTTTCTGTTCTTCGTGTTCCGTG7023,23DNA70TCCCAAACATACTTGCTTCCACTAAATGACCAAAACGACGACACTC7123,23DNA71AGAGAACACTCCCTCCAAAACTCCCGACGGATCTAGGTATTATGCT7223,23DNA72CCCTCAACAACTCTCTCTCACAAGAATTGAGTAACCGGCGGTAATG7323,23DNA73ATGAATGTCGCTAAGGGTCAGTTGGTTCCACAGTGCAGTAACTTTC7423,23DNA74CATGGTGGTTGTTGTTGTTCAGATAAAAAGAGAGTTCTTGCGCAGC7523,23DNA75TTCTTCACATTTCCGCAGTTGTCCAAACTCATACAAAGGGGCCTTG7623,23DNA76AGGAGAGACTTTTGAGACAGCTGATGAAATCAAGTGCAACCAAGCA7723,23DNA77TCATATTCCACTGCAGCTCCAATCACTGCCACAGTACTAGGACAAT7823,23DNA78AAGGACATAGCCAATTCGACCATGAGGCTATGCATACAATCCTGGA7923,23DNA79TGCGTCTTTTTAAGCCCTTTAGCGCTCGAAATCCTTGAGCAGATTC8023,23DNA80GGTTCAGGTTTGACTCTATCCGTTTCCGACGAGATCTTGGAGAATC8123,23DNA81ATTGGATGCGAGTTCACCTATGTTGGGTTGGGCGGATAAGAAATAA8223,23DNA82AAGAATCTTTTGCTTGTGTGATTACCCTCTTGCTCTTGAATGTTCT8323,23DNA83ACAACACAACCAAAGCTCAAACAGCACCGTACGATTTTCTCTTCAG8423,23DNA84CAAACTCCTCAAAACCTTCGTGACGTCCAATAATTGTTGTGCAGGT8523,23DNA85TTTTGAGAACATGATGACGTGGCAATAACACCACCATGCATCAACC8623,23DNA86GGGTTTGTGGATTTTGAGAGTGGGGGTTCTTTGCACATCGATTTCA8723,23DNA87GAAACTACCAACACAAAGGAGGCCTTTGTTGTATTCGGTTGCCTGT8823,23DNA88CAAGAAGAAAACTCACCACCGTCAGGACGAAATGAAAGAGGACGAA8923,24DNA89GTGTAACCTTCAGTCACTTGCACTCATGCAATTTACCAACTCATGCA9023,23DNA90TTCTTCGTCAAACCCTTACTGGTCATCAGCAGAAGCAGAAGTAGGA9123,23DNA91TAGGGATTTCGTTTCGAGGTGTTTCTGATGCTACCAATTCAGTTCT9223,27DNA92GTGGCTCACGAGAATCTACTTCATCATTGGAGTAAAATACAAATTGGTCA9323,23DNA93AAGCAGAGGACAAAATAAGGGGTGGACAGAAGAAGGCGAATCAGTA9423,22DNA94TTCTAATCCCTCCAGTTTCGACCGATACAGTAGAAGCGGTGGTGG9523,23DNA95TGCTTCCAAATGCACACAAGAAATATACGGTGGTGTGCTAGTGATG9623,24DNA96TGAGAAGCAAGCTTTAGCATGTGTCAGCAATATTTACATGGGCAACA9723,23DNA97ATCCTCCGTTGTGTTAGAGCAATACATTTGCTGCATAATTCCCTCA9823,23DNA98TTAAGGAGAAGCTTCCAGGACACCTCCAAAGCCTCAAAACAACACA9923,23DNA99GTGCTATGAAGGGTGGCAATTTTTGGCATGCCACCATTATTTTTGT10023,23DNA100ACAAAAATAATGGTGGCATGCCATCATAGCTTGAACATCACCACCA10124,23DNA101GGGTTTGCTATACCTGCAATTTCAGGACCGCAAAATATGTTTTTCCC10223,23DNA102CATTGGCAGGTTTGGATCAACTTGCTGCAAGAAAAGCTCAGAAAGA10323,23DNA103CACACGTATTATTTGCAGGTGGGAAACTATTGTGCCGTTTCTGTGG10423,23DNA104AGAGAGAGGTTTGGTTCATGTGTGACCCAAATTGCTTCCAACTCTC10523,23DNA105TTATCTAGGGCCAGAGAGTTCCATGAGAAGTGGGCATCAACACATA10623,23DNA106TGATACTGACAGCAAGCTCAGTTCAGATCACGTAGCGATAACTCCA10723,23DNA107CGTTGAGCTGCACTTAAAGGAAACGACAGATAAGTTTCATGACGCC10823,23DNA108GCAACATTGGTTATGGAAGAGGTGAAACAGGGAAAAGGGCAAGAAA10923,23DNA109CTGGTCCTCTTCATGCTGGTATTATCTCTTCCTCGTTGGTCTGTTC11023,23DNA110GCCTATGTACGCTTGATCATTCTATCAAGACAGACAATGCACATGC11123,23DNA111CGGCAGTATCAACACAACAAGAGGTACTCTTCCCGCTAGATTGAGG11223,23DNA112CAATCCTTCTCTCACCTTCACCAACATGGTTGGAGGAAAGAGAGAC11323,23DNA113AGCAAAATCGAGGGCATCAAAAAGAGAAAAAGTGTTGACTCCACGG11423,23DNA114CCTTCAGATGCATTGCTAGAAGCTTACAAGTGACGAGGATCTGGTG11523,23DNA115TACTCCCTCCGTCTCATTAGGTTTGAGAATAACTGCTGCAAGCTTG11623,23DNA116GCCAAGATGGGTTGAACTCAATTACAGAGTAGCAGTATGCCAACAA11723,23DNA117AGTCGTGGACAAATAATTGGGGAGCTGAAGATGACTCTCACTGGAA11823,23DNA118TCCCAATCTTCTTCATCTTGCGATTCGCCGGAAAATCTAACCCTAA11923,23DNA119TGTCCAATACACGTGTTCAGGATTGATCACTGCATAGGGGCTTAAG12023,23DNA120CTTCACCCTCATCTGCTTCTTCTGACCCAAACATGTTTTCCTCCAG12123,23DNA121ACAGAACCACTTGATGACTTCGAGTCAAGGTGCACAAGGAACTAAC12223,23DNA122AAAAGCATGGCCTTCCTATCAGATCGCACGGGATAGAGTCTAGTAT12323,23DNA123AGACCACGATTCATCATTCCCAAATTCCGATGTGAAGTATAGGCGT12423,23DNA124GCAATCTAGTTTCTGATCGTCGCCTACGCCGTTCTTTCGTTAATCC12523,23DNA125GGTAGCAATTTGGCATTGGAGTTCAATCTCGGATTCAAGTCATGGC12623,23DNA126TCTTTTCAATTGCGTGTCTCGTCAGAGCATTGAGAACTCTGCAGAA12723,23DNA127GTTGGTGGTCTCACATTGAAAGGATCGTTTGCAATTGGTTGACTGT12823,23DNA128CCTTGCCCTTACCTCTCTTCTTTTCACCAAACAAAGGTTCCAATGT12923,23DNA129AGTGAGGGGAATCTGAGAAACTTGCTTTCTTCTTTTCCTCTGCCTG13023,23DNA130TACCCTCATCACTCTCACCTTCTCCAGAACTCGAACTTGATCCTGA13123,23DNA131GTGCATATGGATCTTGAGGTGGATGTTCTTGCTTGTTTTGTTCCAA13223,23DNA132ACCTGCAATCTTGAGGGTAACATTCTTAGGTCAAGAGCCTGTTGTC13323,23DNA133TGAATTGAGGGGTGCGAATAGAAGGACAACAAGAAGGAGCAGTAGA13423,23DNA134GTGCACGTTTATTTTGTCTGGGAACTCCAAGCTCCAAAGTTAAGGT13523,23DNA135GAAGTGGTTTTCGTGAGTGACTGGCAATAAACACGACGACGATGAT13623,23DNA136AGGATGGATACTCCCAGTCAAGACTCAACCTTCACCCAAACTGTTC13723,23DNA137CGCGACTTTGCTCATAGTAAGTGTGTGTACAATGGATGGGAAGGAG13823,23DNA138AGAAACGGACCACAATCTGTTCATCTCTCCTTGGATAGACTGTGGT13923,23DNA139TTCAAGGCTATGTCCATTGTCCACCTATGACTGAAGGTAGCCATCC14023,23DNA140GAGAGGAGAGGAAAGTGTTGTGTGCTTCTTTTCTGAGCTAGCCATC14123,23DNA141AACCAAGCTTCTTCATGGAGAGTGGGTTTTCTGATTCGGGTTCTTG14223,23DNA142GGAAGAACCAATTTCCACCGTTTGGTGAACTTAGGTTTAACGGTGC14323,23DNA143TGTTGCTGCTTGTGCTACTACTAAACCCATAAGTTGATCATCATCA14423,23DNA144CATCCCTTTGAGCTCCTCTTGATCCTATGACTTGGCAGCATTGAAG14525,23DNA145TCCAAAATTAAGCAAACAACTGAGATGGCATCTTCCTCCATTTCCATT14624,23DNA146TGAGGCATTGACAAGTAGAAAACAATTCCTCTAGCTGGAGAGATGGT14723,23DNA147GACACCACCACTTGCATAACTTCAACTTCATGGTCGGACATTACGA14823,23DNA148CCGTAACTCCACCGATATCACATATCCAATTTTCTCCGCAAATGCA14923,23DNA149TCAAAGATGAAACTGCATGGTGACACCGTAGTTTGAACATTGGTCC15023,23DNA150TATTGGTGGGTCTAGTTGGTTGGTATAGAGCATGGCGTTTTACCCA15123,23DNA151AGCATCATGATTTTCGGTGTTCGGGTTGGTCATGCTAGCACTTTTT15223,23DNA152AAAAGAGAATCCATTCGCAACCGCGCTGTTCTAAGCTTCTTCTTCG15323,23DNA153CTGTCAGGCTTTGGTTTGAAAGATGCCAACGCAACTAAACAAGAAT15423,23DNA154AAAGGTGTGTCAACCGGTTAATGGGATGTGGAGAAAATGGAATGGC15523,24DNA155GGGCTGCCCTTTAAGCTATTTTTGGTAAATGTGGTGGTATGGTAGGT15623,23DNA156AGTAAGAAAGGGTTGCACAGTGACACACCACCAACCTAAACCAATG15723,23DNA157GTTGTAAAGCTTCCCGACGAATCCGATTTCGTTCAATCGTTCGCTA15823,23DNA158TAGAAACCACAAAAACCACAGCCTTCTATACGCAACTCAAACCGGT15923,23DNA159CCTTCACTAAAGTTTTCCTGCCGGATGTTGTTTCATCCTATGGCGG16023,23DNA160TAACCACCGTCTTCGATTTGAGTTGATATCACTGCAAGACCAGCTT16123,24DNA161TCAAAACCACGGTATGCTGAAACTCACCTTTCAAGTGAATTTGTGGT16223,23DNA162TTTCACCGCTCTCAGAAACGATATGGGTTGTTGTGAATCCTCTTTG16323,23DNA163TCCGAACTAGTCCCTACTTCCATGTTGAGGGTAAATTGGGAAACGG16423,23DNA164CCCTTCGTCGAGCAAATTTTCTTGGGACTTAATTGAACCCTCACCT16523,23DNA165TCCTAACGTATAGAAGCCACGTGTGATATCGACGAAGGTAGCTGTG16623,23DNA166TGAAACTTCATCACCACCGTACAAAATTCGCGTGGGTTTATCGAAA16723,23DNA167TTGTTCACGCAATTAGCTTCACATGTGTGTAGTATTGCCCACATCA16823,23DNA168CAAACAGGCAGTACCAGTTCATGCAATCCCTGAGAATGAGAAGGCT16923,23DNA169ATCGAGATTGTGTTGAAGACCCATTCAATGGAACGTGCAAGAAGAC17023,23DNA170CCTAATCAACAAACCCGCCATACGGATGGTGCTTTGGATTTGACAA17123,23DNA171CATGACTCCACCCACCATAGTAGCACGGAAAGACAAAGTGACAGAC17223,23DNA172GCACCAATGACAACTCCTCTTTCGAATCTGACTTCGAATTCCGCTG17323,23DNA173AAGGAACATAGAGCAAAACTGCGACCACTGTTCTTTTGTCATTTGA17423,23DNA174CAGAAATGGTGGCAGATGGTTTTTGAAAGGGTAAGGTGAAGTGAGT17523,23DNA175TTGTCATATAGGGCTCAGACTGCTTAGAAGCTCCTCCATGAACAGG17623,23DNA176TCCTATCTCGGATCGGGTCAATACACCCTTACTTCCACCCCTAATC17723,23DNA177AGGGTTGGTGGATCTGTTTCAAATCCATTTCCACCACATGATGCTA17823,24DNA178AAAAGCGTGTTTGAACCCTCAAATTCTTCTGGTTCAGTGATGGAGG17923,23DNA179CTCCTTTTCAGTAGTCCTCTCGGGCAGCACTAAAGAAAGGCAGAAA18023,23DNA180ATTGTGTTTGTGTCGGTGTTGTTCATTGCCTCCTTCTCCTCTTCTT18123,23DNA181TGACATCAATCGCTTAGCTCAAATCCACGATGAGTCTATTGCATCA18223,23DNA182ACTTTGGTTCACTCTGTACCTCCGCTTGATGACTGGGTACTGTGTA18323,23DNA183ACCTTATTCTCCCCCTTGTTTCCTTTACCTGGGTCACGAATCTCAG18423,23DNA184TCTGGTTCATCATCTTCCGTTGTCAAAGCGTGCTCGTTATCATCAT18523,23DNA185CTCTACATTCCACCCCCATTCTCAATTTGTCGAGGTTTATTCGGCC18623,23DNA186AGGTGGGAAAATGCCATTCAAAACACTTTCTCAAGTCAGGCAACAG18723,23DNA187TTTCGTGGGTTTACTAGGTTGGTGGCATCACCAAACACATGGATTA18823,23DNA188ATCTGCGCCATTGAAACTTCTTCAAACACGTAAACATCATTGCGGT18923,23DNA189TGAGTTTGCATCACTTTGAAGTTCCCTTTCACAAGTTTGAAGGCAT19023,23DNA190CTTTACTCATTCTTTGCCGACCCAGCAGCAATAGACATCTGAGCTT19123,23DNA191TGGTTGTTGCTGTTGTGTTTCATAGCCTCTAAGCTCATTTTCACCA19223,23DNA192TCACAACACCACAACTCAACAACTGTTTGTTGAAGGGTTTCCGATG19323,23DNA193GTGCAGATCATCGGTACTCTGATAGAACCGGATCAAACCTTAACGA19423,23DNA194GTAGTTATACCATTTGGCCCCCTTCCCGATAGTGATTCCTATGCAA19523,23DNA195GAGAGGTGTTATAGCGAGATGGGGATGGGGGAATTAGGGCTAGATG19623,23DNA196GAAGGGGTTGTTGGATTTCTTCGAGCCCACAAGTCATACACAGTAG19722,23DNA197GAAAATTGCAGCTCCCTCCATCCTTTTGCCTTGACTTCGCCATAA19823,23DNA198ATGCTGGAGGAGTGTATTCATCCGCAATGAGGAATGAGGCATTTGA19923,23DNA199GGCATGGCCTATTCTAGTCCTAGCCAATCCTAAAGCAGTTAAGCCA20023,23DNA200TTCAAGTCCATGCAAGCTTCTTCCTGTCGACTTCTTACCAACTGGA20123,23DNA201GGCAGAGAGTGAAAGGTGAGTTAGATGGTGTTTCATCCTCCTCAGT20223,23DNA202TTCCTTCTGCCCTCTTTTCTCTCTTTGTCCAAGCACCTTTGTTTGT20323,23DNA203AAATGGTGGAATTAGGCACCTCTAGTCAAGCCATTTGTGTTTGGTT20423,23DNA204TCTCTGGCACCAGTTAAAATGGACTTTAAGAGTTGTTGCTGCTGCT20523,23DNA205AGTCCAAGGAATGCAATTCTCCTTCCAAGATCCACCCAAATAAGCA20623,23DNA206TGTTGTTGACAATTCCTCCAAGCGGCTAAGAAAGTGGTGCCAAATT20723,23DNA207ACTTTCATCTCCACCAGCTTCATAATTTAGCTGATGCCCAACCAAC20823,23DNA208CACGGTGGAGAAGGTACACTTAAAATAAAAGAGGGAATTGCAGGGC20923,23DNA209ATTCTCAGATGAAAATGGTGGCGTGATTTGAGAATGGGAGCCTTCA21023,23DNA210CGCCCTCCATGTTATTGTTTTGTAACTCGAAATTCAGAATGGCGTG21123,23DNA211CAGATGTCATGGCTATCCTCTCCTGGAAATCAGCTGCTGAGTGTAT21223,23DNA212CCTGCAAGTGTTTCCTTTGTCATAAGGTGACCAGTTACGTTACTCC21323,23DNA213CTTTCCACCACTCCATCATCTCAGTTGAGTTTCTACCACGTCCTCT21423,23DNA214AGAAACAGAAGACCTTATTGCGTTCATGGAGAAGTACGGTTGGATT21523,23DNA215GAAGGGAAGCACACTTTGTACACCTATTACTAGCCTAGCAGCCACC21623,23DNA216GGTCACCGTAGCAATAGTCTGATTCAAAAGTGGGGTCTACACAACA21723,23DNA217CTTGGCCTTTTCATGGACATGTTAAATCTTCTGTGCATCACAAGCC21823,23DNA218TGGTGTGATCGTGATGATGATGATATAGGGACAAATAGTGGCGGTG21923,23DNA219AATGGTTTTGCATAGTGGGGTTGTCAAATCAAACCCCTCACTCTCC22023,23DNA220ATTTCGAGACTCTTTTGGTCGGATTCTGCATAGTACTCTTGTGCGT22123,23DNA221CAGCCATTCCCATTTTCTCCAACGGGATGTAGATTTTGGTGGGTCT22223,23DNA222ACTTGTTGTGCTCTTTCTCCTCTTCCACATCGATTTCAGGGAAGAG22323,24DNA223ATGCAGGTGGTGAAGAACATTTGACTCCCTTCATCCTTATTCTCTCT22423,23DNA224GTCCACCTGTGACTAGACAGTTTCCTCTACGACTCTTCTTCATCGG22523,23DNA225GGCACGAGGTTCCTATTGAAAAGTTTGACAGTCCATGAAGAGAGGG22623,23DNA226TGTCATCTCTCATGGTTCAGACCGCCTCGGCATTACAACATTTTAC22723,23DNA227AGAAGCTTGTGTTTTCAAAGACATCTTCTCACCCTCTCTGCATCTA22823,23DNA228GGTGCTCTTTCTCAATTGGCATTATTCGTGGAGACCAACTAAGGAC22923,23DNA229CACCTTGCCACAGTGATGAATTTCAAGCCAGCCAGCATACTATTTC23023,23DNA230GATGGTGTGTCAACAGAAAAGGGCATGGTGACTCATCCACTCAGAA23123,23DNA231TCAGTCCCTGCTGCAATTTCTATTTTCACGGCGTTTTCCATACAAA23223,23DNA232CCACAGCAACAGAACTGAGACTAGTCCT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AGG31623,23DNA316TTGTCTACCTAATGAACGGTGCAACAAAACACCCAAGAGATATGGT31723,23DNA317AGTACCGCAACCATAACAGTTCTTCAAGACCTTAACTTCTTGGGGG31823,23DNA318TGAAAGAGGGATAGAGGAGGAGGGGAACACAGCACAACAAGTACAA31923,23DNA319CATGCGGCGAAAAGAATTGAAACGGTTCTCTCGAAGATGATGACGA32023,23DNA320TGTGTTGAGGAATTTGAACAGGCCCTCGAATGCGTTCTTTCTTTCA32123,23DNA321GACCAATGCTACCGTCAACTAACCTCCTTAGTGTGTGGTTACTGGT32223,23DNA322AAACGACACCGCATCTTAAATCCGTCGTCGTCTTCATCAACGTTTT32323,23DNA323CCTACTTCATGTGGCTTGTCTCTAGGAATTTTCAAGTGAGGAGGCA32423,23DNA324AGGATGTTATGTCTGGCATGGTTCAGTGTTGTTCTTGTCGTCTTCC32524,23DNA325ACTCTAAGGTTGCAAAGTAGAGCAAGCTAGGAACATGATCAAAGCCA32623,23DNA326GTGGCTTTGATCATGTTCCTAGCAACTCTTCCACTCTTTGATGGCT32723,23DNA327ACCATTGTCAAGAGAGATGGCTTATCGCGTTGACATTTCAAGTCAT32823,23DNA328TCGGCAGAATTATCCTCCTTCTGAAGTTTGTCAAGCGGGCTATTTC32923,23DNA329TAACATCACTCTGAACAGCACGATCTCTCACGGTAGGGATTCTCTT33023,23DNA330AGGAAGAGAGCATTTTGAAGTTAGGGTCAAAATTGCACATAGCTCA33123,23DNA331AGAGGATGGGAGACTTTCAAAGTAGGCCTCGTTTACTTTCTGAAGA33223,23DNA332TCACATCATCATCCCCAAGTGTTGAAGAGCGAGAGAGAGTGATGAG33323,23DNA333CCTTTTCAACCACAGCCTCAAAACTTCCTCTCTCTTCCATGGAACC33423,23DNA334CGCGTAACAGGAAAGAAAAGTGTTACATGAAAGTGCACGCAGAAAA33523,23DNA335CCCTTGGTCCTTCAACCTACTACTAGAGCCCTTGAGATGCACAAAT33623,23DNA336ACACGGGTTTCCTTCCTATGTTTGCCCATTTTTCTCAACCCTCAAT33723,23DNA337ACCCCTAAGCGTGACACATAAATGTTGGAAATTCATGGCAGAGAGG33823,23DNA338TCACCTGATGCTTAAACCTACCCGTGGACTATATGCTTATCCCGCA33923,23DNA339TTCTCTAGAATGGGGACTCTCGTACATGCTTACTCAATGGCCTGTA34023,23DNA340GACGACTCTTTCAACTACCCACTCTCACTTCTGATACCCGGTTGAA34123,23DNA341ACTAGGAGTAGCGCAATCTCTTGAAGGAACGGTGGTGGTTGTTATA34223,23DNA342GTGTTCGATTTCTTGACGTTGGTAGAGCAACAACCAACAACAACAA34323,23DNA343AGCTAAAGGACGAGTAATGGTGGCTTGAATTTGGTGGTGATGGCAT34423,23DNA344GAATTCGACACTACTCCTCCTCCATTCATCTTCTCTCACCAACCCC34523,23DNA345TGGAGGATGCTTCAATTGTGGTATATCAACGATAGCCTCCAGATGC34623,23DNA346TGAGGGGAAAATCGAGGAAGAAGGAGAAGGAGGAGAAGGCATTGAA34723,23DNA347CTTGCTTCCTTGTTCTGCTTTCTACAGATGCGTTTGAACCTAGACT34824,23DNA348AGATGGGAATCGGGATTGTAAAGAACAAAAATGCTGTCGCTTGTGTA34923,23DNA349GAGGGTTTAGGGGGTAAAGGAAGGCAGCCTAGAGAGAATAGACACC35023,23DNA350CTGTGGAGCAAGAAATGGAAAGGCTTTTCAGAACATTCCCTGCCTC

权利要求：1.青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点，其特征在于：该ESR-SSR遗传标记位点是指通过青藏扁蓿豆幼苗转录组测序获得转录本，对转录本中SSR位点检测后，根据转录本上SSR位点侧翼序列设计的如序列表中Man1~Man350所示的引物核苷酸序列。2.如权利要求1所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点，其特征在于：所述EST-SSR遗传标记位点的引物序列在青藏扁蓿豆和扁蓿豆基因组DNA中的扩增产物长度，为相同和接近如序列表中Man1~Man350所示的引物的预期扩增产物碱基序列长度。3.如权利要求1或2所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆种质资源商业性遗传多样性评价方面的应用。4.如权利要求1或2所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆商业化品种选育中的应用。5.如权利要求1或2所述的青藏扁蓿豆ESR-SSR遗传标记位点在青藏扁蓿豆和扁蓿豆功能基因商业化鉴定开发中的应用。

百度查询： 中国科学院西北高原生物研究所 青藏扁蓿豆EST-SSR遗传标记位点和相应标记引物序列及其应用