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申请/专利权人：东北农业大学

摘要：一种鉴定东北林蛙遗传性别的分子标记及其应用，它涉及分子标记领域。为了解决目前无法对东北林蛙遗传性别进行鉴定的问题，本发明提取东北林蛙脚趾组织的基因组，以提取的基因组DNA为模板，以含SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示序列的引物对进行PCR扩增反应。通过14%的聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳检测，扩增结果具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列（261bp）对应条带的个体为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应条带的个体为遗传雌性东北林蛙。该发明可鉴定伪雄个体，即生理为雄性，但遗传为雌性的个体。利用伪雄个体与雌性个体交配，产生的后代，生理雌性比例高达90%以上。能实现对东北林蛙养殖群体性别控制，提高东北林蛙养殖的经济效益。

主权项：1.一种鉴定东北林蛙遗传性别的分子标记的应用，其特征是按以下步骤操作：（1）提取东北林蛙脚趾组织的基因组DNA，（2）以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增反应，PCR扩增反应所用上游引物为SEQIDNO:1所示序列，即5’-GGTCATTCCTTGTCCTAATTATCAGT-3’，下游引物为SEQIDNO:2所示序列，即5’-GACTGCGTACGAATTGAG-3’；（3）用14%的聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳检测，结果具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应的261bp条带的个体为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应条带的个体为遗传雌性东北林蛙；（4）对遗传雄性特异性条带进行回收纯化、测序，确定其为东北林蛙性别特异性分子标记，即SEQIDNO:3，所述分子标记表现为SEQIDNO:3所示核苷酸序列，GGTCATTCCTTGTCCTAATTATCAGTTGCAGAATATTTAATAAATATATGCAGAGTTCCAAATGGATTTTAATAGACCTTGTTTTAGTCTAGTTCCACGTGGCTGATTTTTGCGGTATGCCCAAATTAGCAACCCAGGTGTAAAGAAGTCCTGCTGGGATTGGTTTATTTCTGCTGAGTTGTAAAAGAAGTAGCTGACAACAGGACTGTGTAAGACCAATCTCGATCACTTGGGCTTCTCTTTCTCAATTCGTACGCAGTC具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列的个体，表现为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO：3所示核苷酸序列的个体为遗传雌性东北林蛙。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 东北农业大学 一种利用TRAP分子标记技术鉴定东北林蛙遗传性别的方法