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申请/专利权人：农业农村部环境保护科研监测所

摘要：本发明涉及微生物领域，具体而言，提供了一种链霉菌TJ561、防治土壤连作障碍的产品及其制备方法和应用以及丁香酚的应用。本发明提供的链霉菌TJ561，保藏编号为CGMCCNo.17247。具有提高蔬菜抗病能力，抑制土传真菌病害，促进作物生长和提高作物产量的多重作用。该链霉菌TJ561在改善土壤连作障碍方面具有良好的效果，利用该菌株制备的防治土壤连作障碍的产品，施入土壤后，菌株能够有效抑制病害，促进作物根系生长，提高产量，使常年连作产生的土壤问题得到修复，有助于现代农业的集约化生产发展。本发明提供的防治土壤连作障碍产品的制备方法，简单易操作，成本低，适合大规模的生产。

主权项：1.一种利迪链霉菌（Streptomyceslydicus）TJ561，保藏编号为CGMCCNo.17247。

全文数据：链霉菌TJ561、防治土壤连作障碍的产品及其制备方法和应用以及丁香酚的应用技术领域本发明涉及微生物领域，具体而言，涉及一种链霉菌TJ561、防治土壤连作障碍的产品及其制备方法和应用以及丁香酚的应用。背景技术设施蔬菜生产是一种人为作用很强的土地利用形式，具有高投入、高产出、重茬连作普遍，且经常处于封闭状态等特点。同一种作物连作后，可以使某些特定的微生物种群得到富集，特别是植物病原真菌，不利于土壤中微生物种群平衡，而有利于植物根部病害的发生，使产量逐年降低。大棚蔬菜连作土壤随着连作年限的增加，真菌的种类和数量减少，但有害病原真菌的种类和数量增加。目前，由于连作导致的设施蔬菜土传真菌病害已经成为设施蔬菜优质安全生产的关键制约因素。为降低土传真菌病害危害，在设施农业生产过程中经常采用化学农药对土壤进行熏蒸或直接大量喷洒化学农药的治理方式。然而，部分化学熏蒸药物可能会导致严重的大气污染，破坏臭氧层，目前已明令禁止使用；大量使用农药处理土壤可能导致化学农药在农产品中残留超标并且会大量杀伤有益土壤微生物种群，导致土壤肥力下降，降低产量。生物防治技术具有不污染环境、对人和其他生物安全、防治作用持久、产品无残留、对病虫的杀伤特异性强，易于同其他植物保护措施协同配合并且节约能源等优点。经过多年的实践证明，生物产品具有抗病、增产的效果，市场上较为成熟的防治土壤连作障碍的产品，主要包括有苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等。目前的防治土壤连作障碍的产品中微生物主要为活菌形式，并且具有产品的保质期短的缺点。有鉴于此，特提出本发明。发明内容本发明的第一目的在于提供一种链霉菌TJ561及其在防治土壤连作障碍方面的应用，该链霉菌TJ561抑菌土传真菌病害的效果好，可以有效提高设施蔬菜生产的产量，丰富了改善土壤连作障碍的菌种种类。本发明的第二目的在于提供一种防治土壤连作障碍的产品，提供一种可以有效抗菌和增加设施蔬菜产量的产品。本发明的第三目的在于提供一种提高链霉菌TJ561产孢率的方法，以缓解现有技术中链霉菌发酵产孢率低，链霉菌利用率低的技术问题。本发明的第四目的在于丁香酚在链霉菌发酵中提高孢子产量的应用。为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：一种链霉菌TJ561，保藏编号为CGMCCNo.17247。上述链霉菌TJ561在防治土壤连作障碍或制备防治土壤连作障碍的产品中的应用。一种防治土壤连作障碍的产品，包括上述链霉菌TJ561。进一步地，所述产品中所述链霉菌TJ561的孢子数不低于106个g。上述防治土壤连作障碍的产品在防治土壤连作障碍中的应用。一种提高链霉菌TJ561产孢率的方法，所述制备方法包括采用丁香酚作为孢子萌发诱导剂进行链霉菌TJ561发酵。进一步地，所述方法采用丁香酚对链霉菌TJ561的孢子悬液进行发酵；优选地，所述丁香酚的浓度为0.5-2.0mgL，优选为1-1.5mgL；优选地，所述孢子悬液的浓度为1.0×107-1.0×109个ml，优选为5×107-5×108个ml，进一步优选为1.0-2.0×108个ml。进一步地，所述孢子悬液的制备方法包括：链霉菌TJ561利用第一固体培养基，在27-29℃条件下倒置培养3-5天，收集孢子至无菌水中，得到孢子悬液；所述第一固体培养基包括：葡萄糖6-9gL、蛋白胨1.5-3.5gL、豆粕粉1.5-2.1gL、酵母粉1-2gL和琼脂粉17-23gL，第一固体培养基的pH为8.0-8.5。进一步地，所述发酵的条件包括：在26-28℃条件下固体发酵2-4天；优选地，所述固体发酵用的第二固体培养基包括：麦麸4500-5500gL、葡萄糖35-45gL、蛋白胨60-70gL、豆粕粉25-35gL和酵母粉15-25gL。丁香酚在链霉菌发酵中提高孢子产量的应用。与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明提供的链霉菌TJ561具有提高蔬菜抗病能力，抑制土传真菌病害，包括番茄灰霉病、白菜黑斑、豆角菌核和辣椒疫霉等，促进作物生长和提高作物产量的多重作用。该链霉菌TJ561在改善土壤连作障碍方面具有良好的效果，利用该菌株制备的防治土壤连作障碍的产品，施入土壤后，菌株能够有效抑制病害，促进作物根系生长，提高产量，使常年连作产生的土壤问题得到修复，有助于现代农业的集约化生产发展。本发明提供的防治土壤连作障碍产品的制备方法，简单易操作，成本低，适合大规模的生产。附图说明为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为实施例1中菌株TJ561基于16SrRNA基因序列构建的系统进化树；图2为实施例1中菌株TJ561在ISP4培养基上培养4天显示长孢子链；图3为实施例1中菌株TJ561在ISP4培养基上培养7天显示球形孢子。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有实施方式以及优选实施方法可以相互组合形成新的技术方案。本发明中，如果没有特别的说明，本文所提到的所有技术特征以及优选特征可以相互组合形成新的技术方案。本发明中，如果没有特别的说明，所涉及的各组分或其优选组分可以相互组合形成新的技术方案。本发明中，除非有其他说明，数值范围“a～b”表示a到b之间的任意实数组合的缩略表示，其中a和b都是实数。例如数值范围“6～22”表示本文中已经全部列出了“6～22”之间的全部实数，“6～22”只是这些数值组合的缩略表示。本发明所公开的“范围”以下限和上限的形式，可以分别为一个或多个下限，和一个或多个上限。本发明中，除非另有说明，各个反应或操作步骤可以顺序进行，也可以不按照顺序进行。优选地，本文中的反应方法是顺序进行的。除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本发明中。本发明中的链霉菌TJ561，于2019年02月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.17247，该菌株的分类名为利迪链霉菌，拉丁名：Streptomyceslydicus。本发明提供的链霉菌TJ561具有提高蔬菜抗病能力，抑制土传真菌病害，包括番茄灰霉病、白菜黑斑、豆角菌核和辣椒疫霉等，促进作物生长和提高作物产量的多重作用。该链霉菌TJ561在改善土壤连作障碍方面具有良好的效果。本发明提供链霉菌TJ561在防治土壤连作障碍或制备防治土壤连作障碍的产品中的应用。在优选地实施方式中，防治土壤连作障碍的产品包括生物土壤修复改良剂、生物菌肥、复合生物菌剂或生物有机肥等，其中，复合生物菌剂为链霉菌TJ561与其他有益菌，例如但不限于枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、哈茨木霉、酵母菌和双歧杆菌等，配合组成的制剂。一种防治土壤连作障碍的产品，包括链霉菌TJ561。该产品施入土壤后，菌株能够有效抑制病害，促进作物根系生长，提高产量，使常年连作产生的土壤问题得到修复，有助于现代农业的集约化生产发展。在优选地实施方式中，产品中链霉菌TJ561的孢子数不低于106个g。链霉菌的孢子形态可以有效保证产品的保质期，孢子单位含量的多少是菌株在土壤中的定植率的重要保证，孢子数不低于106个g的产品可以保证改善土壤连作障碍的效果，提高产品的品质。一种提高链霉菌TJ561产孢率的方法，包括采用丁香酚作为孢子萌发诱导剂进行链霉菌TJ561发酵。在优选地实施方式中，方法包括采用丁香酚对链霉菌TJ561的孢子悬液进行发酵。以孢子悬液作为种子进行发酵可以有效缩短发酵周期，提高发酵效率。现有的链霉菌的生产有固体和液体发酵两种方法，液体发酵产品以菌丝体的形式存在，不易形成孢子。相较于液体发酵，固体发酵更易于孢子的产生，但是生产周期较长，产品质量不稳定，现有技术的产孢率也有待提高。对于产孢率的提高，现有的改进方法主要集中在发酵条件、培养基营养物质等方面的改良上，但在本发明中，发明人发现在链霉菌孢子发酵的过程中，通过添加适宜浓度的诱导剂可以大幅度地提高发酵中的产孢率，效果显著优于现有的方法。经过大量的试验最终发现丁香酚可以提高链霉菌发酵生产过程中的孢子数100倍左右，有效降低了生产成本，提高了产品产量。在优选地实施方式中，丁香酚的浓度为0.5-2.0mgL，优选为1-1.5mgL。通过试验发现，丁香酚在一定浓度内可以有效刺激孢子的生成，浓度过高会产生抑制的作用。丁香酚的浓度典型但非限制性的为0.5mgL、0.7mgL、1mgL、1.3mgL、1.5mgL、1.7mgL或2mgL。在优选地实施方式中，丁香酚溶解于乙醇溶液中，并与孢子悬液混合后进行发酵。在优选地实施方式中，孢子悬液的浓度为1.0×107-1.0×109个ml，优选为5×107-5×108个ml，进一步优选为1.0-2.0×108个ml。孢子悬液的浓度在1.0×107-1.0×109个ml范围内，既可以保证种子的活力，又可以有效保证菌株的快速发酵，缩短发酵周期。孢子悬液的浓度典型但非限制性的为1.0×107个ml、5.0×107个ml、8.0×107个ml、1.0×108个ml、1.5×108个ml、2.0×108个ml、5.0×108个ml、8.0×108个ml或1.0×109个ml。在优选地实施方式中，孢子悬液的制备方法包括：链霉菌TJ561利用第一固体培养基，在27-29℃条件下倒置培养3-5天，收集孢子至无菌水中，得到孢子悬液。第一固体培养基包括：葡萄糖6-9gL、蛋白胨1.5-3.5gL、豆粕粉1.5-2.1gL、酵母粉1-2gL和琼脂粉17-23gL，pH8.0-8.5。链霉菌TJ561在该培养基上固体发酵，可以快速大量地得到发酵所需的孢子种子液，形成的孢子质量好。进一步优选地，第一固体培养基包括：葡萄糖8gL、蛋白胨2.5gL、豆粕粉1.8gL、酵母粉1.5gL和琼脂粉20gL，pH8.0-8.5。在优选地实施方式中，链霉菌TJ561的发酵的条件包括：在26-28℃条件下固体发酵2-4天。优选地，固体发酵用的第二固体培养基包括：麦麸4500-5500gL、葡萄糖35-45gL、蛋白胨60-70gL、豆粕粉25-35gL和酵母粉15-25gL。该培养基营养丰富，产孢率高。进一步优选地，发酵用的第二固体培养基包括：麦麸5000gL、葡萄糖40gL、蛋白胨65gL、豆粕粉30gL和酵母粉20gL。丁香酚在链霉菌发酵中提高孢子产量的应用。发明人发现，在链霉菌发酵过程中，通过添加丁香酚作为孢子诱导剂，可以高效地诱导孢子的产生，提高发酵过程中的产孢率，极大地降低了生产成本，缩短了发酵周期，有利于工业化的大规模生产与应用。本发明最后提供一种利用上述防治土壤连作障碍的产品改善土壤的方法：在设施菜地种植蔬菜以前，按照30kg亩的用量，将发酵获得的菌剂产品均匀的撒施到地表，旋耕机或人工将菌剂翻入地下，灌水一次。其它条件均按照当地种植习惯进行种植和管理。下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。实施例1链霉菌TJ561的筛选、鉴定和保藏1本菌株TJ561分离自天津市宝坻区菜地土壤。将采集到的田间土壤样品于100℃烘箱中烘干24小时，取出于常温下凉至室温后备用。2菌株固体分离培养基制备方法：分别称取葡萄糖5.0g、淀粉6.0g、麦芽浸膏5.0g、酵母粉3.0g、蛋白胨2.0g、硫酸铵3.0g、碳酸钙0.2g，加入1.0L的水充分溶解，用0.1M的氢氧化钠调节pH＝7.5-8.0之间，再加入20g琼脂粉，混合均匀后按照每瓶200ml的装液量分装于500ml的三角瓶中，于121℃下高温灭菌30min，待培养基于常温下冷却至50-60℃时，分别向每瓶培养基中加入浓度为1000mgL的无菌制霉菌素水溶液1.0ml，混合均匀后，按照每皿20-25ml的加入量倒入直径9cm无菌培养皿中，常温下冷却后制备得到菌株分离固体培养基。3菌株分离过程：称取1中经过高温烘干并冷却至室温的土壤样品0.5g于10ml无菌试管中，加入5ml的无菌水，加盖后充分震荡10min，使土壤样品完全分散于无菌水中。静置30min后，吸取上清液0.2ml均匀涂布于2中制备好的固体菌株分离平板培养基表面。每个土壤浸提液样品涂布15-20个培养基平板。将平板倒置放置于28℃的生化培养箱中，培养10-15天，用接种环挑取分离到的单菌落于新制备的分离培养基上。在生化培养箱中倒置培养5-7天，再次分离纯化一次即可获得TJ561的单菌落。4经测序，菌株TJ561的16SrRNA基因序列如下SEQIDNO.1：GACGAACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGATGAACCTCCTTCGGGGAGGGGATTAAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTTCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATACGACACGGGGTCGCATGACCTCCGTGTGGAAAGCTCCGGCGGTGAAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTGATGGCCTACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAGAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCGCGTCGGATGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCATTCGATACGGGCAGGCTAGAGTTCGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGTTGGGAACTAGGTGTGGGCGACATTCCACGTCGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGTTCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCAGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCAAGGCTTGACATACACCGGAAACGTCTGGAGACAGGCGCCCCCTTGTGGTCGGTGTACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTTCTGTGTTGCCAGCATGCCCTTCGGGGTGATGGGGACTCACAGGAGACTGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCTTGGGCTGCACACGTGCTACAATGGCCGGTACAATGAGCTGCGATACCGCGAGGTGGAGCGAATCTCAAAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTTGCTAGTAATCGCAGATCAGCATTGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCACGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCCAACCCCTTGTGGGAGG菌株TJ561的基因进化树：经过16SrRNA基因序列比对显示，菌株TJ561和菌株StreptomyceslydicusNBRC13058T的相似性最高，为99.4％。基于16SrRNA基因序列构建的系统进化树如图1所示。5菌株TJ561的形态学观察结果：扫描电镜结果如图2和图3所示，其中，图2为ISP4培养基上培养4天显示长孢子链；图3为ISP4培养基上培养7天，显示球形孢子。在ISP系列培养基上基生菌丝和气生菌丝丰富。基生菌丝分枝、不断裂，气生菌丝分化成长孢子丝，波曲；孢子呈球形，表面光滑。实施例2链霉菌TJ561的抑菌作用菌株TJ561的室内抗菌谱试验。1发酵液制备：采用挖块接种法，将在固体斜面培养基上生长成熟的菌株TJ561接种到含有葡萄糖15gL、蛋白胨6gL、酵母粉4gL、碳酸钙0.2gL，pH＝7.5-8.0的液体培养基中。于28℃转速为180转min的条件下，培养96小时。3000转min离心5min，取上清液备用。2菌株TJ561在室内对多种植物病原真菌都具有良好的抗菌效果。在无菌操作台中，用接种环刮取生长在斜面试管中的植物病原真菌番茄灰霉病、白菜黑斑、豆角菌核和辣椒疫霉的菌丝至装有20ml无菌水和20-25粒直径为2-4mm的小玻璃珠的50ml三角瓶中，8层纱布封口后置于小摇床上，于100转min条件下旋转打碎菌丝体30min。3在无菌操作台中，分别吸取2中经过打碎的真菌菌丝体溶液0.2ml，均匀涂布于固体土豆培养基PDA上。4将灭菌后的牛津杯放置于3中涂布有植物病原真菌的PDA培养基上，向牛津杯中加入1中制备好的0.2ml的菌株TJ561发酵上清液。5将4中的PDA培养基平板放置于28℃的生化培养箱中，培养72h，用直尺量取抑菌圈直径。抑菌圈直径如下表所示：实施例3防治土壤连作障碍的产品1固体培养基制备：分别称取葡萄糖8.0g、蛋白胨2.5g、豆粕粉1.8g、酵母粉1.5g，加入蒸馏水1.0L，用0.1molL的氢氧化钠调节PH＝8.0-8.5，加入20g琼脂粉，混匀后于121℃下高温灭菌30min。待培养基在室温下冷却至50℃左右时，在无菌条件下将培养基倒入直径9cm培养皿中于室温下冷却至凝固后备用。2菌株培养：在无菌条件下，将保藏于斜面试管中的菌株TJ561接种到步骤1中制备好的固体培养基表面上，在生化培养箱中于28℃条件下倒置培养4天。3孢子悬液制备：在无菌条件下，向步骤2中生长好的培养皿中加入10-15ml无菌水，用灭菌后的玻璃棒刮取表面生长至白色的孢子，并将刮取的孢子转移至装有2.0L无菌水的玻璃三角瓶中，在显微镜下计数孢子浓度，调节孢子浓度在1.0×108个ml-2.0×108个ml浓度范围内。4孢子萌发诱导剂的制备：称取10mg的丁香酚，溶解于乙醇中，用乙醇定容至100mL，配置成浓度为100mgL的丁香酚溶液。加入到步骤3中制备好的孢子悬液中混合均匀，制备成含有丁香酚浓度分别为0mgL、0.5mgL、1mgL、1.5mgL和2mgL的孢子悬液。5接种固体发酵培养基：称取麦麸5000g、葡萄糖40g、蛋白胨65g、豆粕粉30g、酵母粉20g，在121℃下高温灭菌30分钟。常温下冷却至室温，在无菌条件下将步骤4中制备的孢子悬液1.0L加入到冷却后的固体培养基中，混合均匀。6固体发酵：将步骤5中接种有链霉菌TJ561孢子的固体培养基装入到长40cm宽30cm深6cm的发酵盘中，装入体积约为发酵盘深度的一半高度。将发酵盘至于无菌室中，在26-28℃条件下发酵72小时。7孢子计数：待发酵结束后，称取1g步骤6中的发酵培养基，在显微镜下计数孢子，孢子数在106个g以上时表明产品合格。不同丁香酚含量对发酵后孢子数量的影响结果如下表所示：丁香酚浓度0mgL0.5mgL1.0mgL1.5mgL2.0mgL孢子数个g1.2×1051.8×1061.3×1071.2×1071.9×106从上述结果可以看出，丁香酚的加入可以大幅度的提高链霉菌发酵过程中的孢子产量，对于提高防治土壤连作障碍的产品的质量具有重要的意义。随着丁香酚用量的不断加大1-2mgL，产孢率又收到了抑制，出于产孢率和成本的考虑角度，丁香酚的用量为0.5-2.0mgL，优选为1-1.5mgL，进一步优选为1mgL。实施例4防治土壤连作障碍的产品的增产应用田间应用：试验用土壤为设施番茄生产10年用土壤，采自天津市宝坻区田块。番茄品种为天丰2号。在设施菜地种植番茄以前，按照0kg亩、10kg亩、20kg亩、30kg亩、40kg亩和50kg亩的施用量，将实施例3丁香酚用量为1mgL发酵获得的产品均匀的撒施到地表，旋耕机或人工将菌剂翻入地下，灌水一次。其它条件均按照当地种植习惯进行种植和管理。统计不同施用量的试验组中番茄的产量，结果如下表所示：施用量kg亩01020304050番茄产量kg850086009100980098909870从上述结果可以看出，本发明提供的防治土壤连作障碍的产品可以有效提高番茄的产量，但是随着用量的不断增加30-50kg亩，产量的变化较小，所以，出于产量和成本的角度，本产品的最佳用量为20-40kg亩。实施例5番茄真菌病害防治次数本实施例测定防治土壤连作障碍的次数，试验的相关信息与实施例4相同，检测按照0kg亩、10kg亩、20kg亩、30kg亩、40kg亩和50kg亩的施用量，真菌病害的防治次数，统计结果如下表所示：施用量kg亩01020304050真菌病害防治次数886444从上述结果可以看出，首先，随着本申请的产品的施用量的提高0-30kg亩，真菌病害防治次数降低，但是施用量的进一步提高30-50kg亩，防治次数并没有减少，说明本申请的产品的最佳施用量为20-40kg亩尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。SEQUENCELISTING农业农村部环境保护科研监测所链霉菌TJ561、防治土壤连作障碍的产品及其制备方法和应用以及丁香酚的应用20191PatentInversion3.511420DNA链霉菌1gacgaacgctggcggcgtgcttaacacatgcaagtcgaacgatgaacctccttcggggag60gggattaagtggcgaacgggtgagtaacacgtgggcaatctgcccttcactctgggacaa120gccctggaaacggggtctaataccggatacgacacggggtcgcatgacctccgtgtggaa180agctccggcggtgaaggatgagcccgcggcctatcagcttgttggtggggtgatggccta240ccaaggcgacgacgggtagccggcctgagagggcgaccggccacactgggactgagacac300ggcccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattgcacaatgggcgaaagcctgat360gcagcgacgccgcgtgagggatgacggccttcgggttgtaaacctctttcagcagggaag420aagcgagagtgacggtacctgcagaagaagcgccggctaactacgtgccagcagccgcgg480taatacgtagggcgcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagagctcgtaggcggct540tgtcgcgtcggatgtgaaagcccgggg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权利要求：1.一种链霉菌TJ561，保藏编号为CGMCCNo.17247。2.权利要求1所述的链霉菌TJ561在防治土壤连作障碍或制备防治土壤连作障碍的产品中的应用。3.一种防治土壤连作障碍的产品，其特征在于，包括权利要求1所述的链霉菌TJ561。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品中所述链霉菌TJ561的孢子数不低于106个g。5.权利要求3或4所述的产品在防治土壤连作障碍中的应用。6.一种提高链霉菌TJ561产孢率的方法，其特征在于，所述方法包括采用丁香酚作为孢子萌发诱导剂进行链霉菌TJ561发酵。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法采用丁香酚对链霉菌TJ561的孢子悬液进行发酵；优选地，所述丁香酚的浓度为0.5-2.0mgL，优选为1-1.5mgL；优选地，所述孢子悬液的浓度为1.0×107-1.0×109个ml，优选为5×107-5×108个ml，进一步优选为1.0-2.0×108个ml。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述孢子悬液的制备方法包括：链霉菌TJ561利用第一固体培养基，在27-29℃条件下倒置培养3-5天，收集孢子至无菌水中，得到孢子悬液；所述第一固体培养基包括：葡萄糖6-9gL、蛋白胨1.5-3.5gL、豆粕粉1.5-2.1gL、酵母粉1-2gL和琼脂粉17-23gL，所述第一固体培养基的pH为8.0-8.5。9.根据权利要求6-8任一项所述的方法，其特征在于，所述发酵的条件包括：在26-28℃条件下固体发酵2-4天；优选地，所述固体发酵用的第二固体培养基包括：麦麸4500-5500gL、葡萄糖35-45gL、蛋白胨60-70gL、豆粕粉25-35gL和酵母粉15-25gL。10.丁香酚在链霉菌发酵中提高孢子产量的应用。

百度查询： 农业农村部环境保护科研监测所 链霉菌TJ561、防治土壤连作障碍的产品及其制备方法和应用以及丁香酚的应用