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一种基于可逆化学酶促标记的O-GlcNAc糖肽富集方法 

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申请/专利权人:中国科学院大连化学物理研究所

摘要:本发明公开了一种基于可逆化学酶促标记‑亲水作用色谱富集的O‑GlcNAc糖肽富集方法。具体涉及:基于Endo‑M等糖苷内切酶的突变体的转糖活性进行O‑GlcNAc糖肽的化学酶促标记,将带有噁唑啉结构的N‑糖链整体转接到O‑GlcNAc糖基上,然后利用亲水作用色谱对标记的O‑GlcNAc糖肽进行一步富集。针对富集获得的引入N‑糖链结构的O‑GlcNAc糖肽,利用野生型糖苷内切酶将标记糖链切除,实现O‑GlcNAc糖肽的无痕富集。与其它O‑GlcNAc糖肽富集技术相比,本发明具有O‑GlcNAc糖肽富集效率高、操作简便等优势,为O‑GlcNAc糖蛋白质组学的研究提供了一种新的解决思路和富集方法。

主权项:1.一种O-GlcNAc糖肽可逆化学酶促标记与富集方法,其特征在于:该方法利用糖苷内切酶Endo-M的N175Q突变体向O-GlcNAc糖基上转移寡糖链以提升亲水性,进而利用麦芽糖亲水作用色谱材料进行O-GlcNAc延长糖肽的富集;针对富集的糖链,利用野生型的糖苷内切酶Endo-MWT和Endo-SWT进行标记糖链的切除,获得生物样品中的O-GlcNAc糖肽。

全文数据:

权利要求:

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