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申请/专利权人：郑州大学

摘要：一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，包括金电极表面滴加有rGO‑PEI‑Ag‑Nf复合溶液的纳米复合材料，在纳米复合材料上固定葡萄球菌A蛋白,然后滴加抗氨苯胂酸单克隆抗体，最外层为牛血清白蛋白，所述的rGO‑PEI‑Ag‑Nf复合溶液包括还原氧化石墨烯、聚乙烯亚胺和银纳米粒子和全氟磺酸，采用以上结构后，本发明具有如下优点：本发明提供了一种用于检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，具有检出限低，线性检测范围宽，灵敏度高，操作简便等优势，本发明将rGO‑PEI‑Ag‑Nf纳米复合材料作为电化学免疫传感器的基底材料，银纳米粒子不仅具有优良的导电性能，还能作为检测电化学信号的氧化还原探针。

主权项：1.一种检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器，其特征在于，包括金电极表面滴加有rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液的纳米复合材料，在纳米复合材料上固定葡萄球菌A蛋白,然后滴加抗氨苯胂酸单克隆抗体，最外层为牛血清白蛋白，所述的rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液包括还原氧化石墨烯、聚乙烯亚胺和银纳米粒子和全氟磺酸；检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：1金电极预处理；2把制备rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液，将溶液滴于步骤1预处理后的金电极上，室温干燥后，在PBS溶液中测试该电极的电流大小；3将0.1-0.8mgmL葡萄球菌A蛋白滴加在步骤2获得的电极表面，30℃-40℃孵育50-70分钟后，冲洗电极表面，晾干，在PBS溶液中测试电流变化；4将抗氨苯胂酸单克隆抗体滴加到步骤3获得的电极表面，37℃孵育30-50分钟后，冲洗电极表面，晾干，测试电流的变化值；5在步骤4获得的电极表面滴加0.25％牛血清白蛋白进行孵育，孵育20-40分钟后冲洗电极表面，晾干，即得检测氨苯胂酸的电化学免疫传感器；其中，步骤2中的所述rGO-PEI-Ag-Nf复合溶液制备方法，包括以下步骤：a将15-30mgrGO粉末分散到20mL水中，超声60分钟，之后向rGO溶液中滴加2mgmL,1-4mLPEI，并在室温下剧烈搅拌5小时；b然后添加20-50mgNaOH，并在90℃下搅拌24小时，将该混合物离心5分钟，并用水洗涤三次，将获得的rGO-PEI沉淀在60℃-90℃烘箱过夜干燥；c向rGO-PEI粉末中添加2-6mL水并超声处理30分钟，然后在磁力搅拌下添加1.5g葡萄糖，同时，将氨水溶液缓慢逐滴添加到2-4mLAgNO3溶液中，直到沉淀突然消失，之后将该溶液添加到含有rGO-PEI的混合物中并搅拌几分钟，获得均匀混合物；d将该混合物在室温下静置1.5小时，然后，在离心5分钟，获得的沉淀在80℃烘箱中干燥；e最后，将所得沉积物在研钵中研碎并重新分散在双蒸水和0.4％的Nf乙醇溶液中，比例为3：1，以获得rGO-PEI-Ag-Nf溶液。

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