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摘要:本发明公开了一种共提取totalDNA、totalRNA和总蛋白的方法。与AllPrepDNARNAProteinMiniKit共提取的步骤相比,本发明提供的方法额外增加了200nt的RNA片段的提取步骤和样本为细胞、组织或菌源样本时的溶菌酶处理的步骤。该方法在总蛋白提取效果不变的情况下,可以实现包括菌源totalDNA在内的totalDNA以及包括smallRNA在内的totalRNA的提取,完全可以满足下游进行宏基因组和smallRNA分析的需求;将200nt的RNA片段和200nt的RNA片段混合,也可进行全转录组的建库测序分析。本发明具有重要的应用价值。
主权项:1.一种共提取样本中totalDNA、totalRNA和总蛋白的方法,通过AllPrepDNARNAProteinMiniKit实现totalDNA、总蛋白和200nt的RNA片段的提取,其特征在于:所述方法还包括200nt的RNA片段的提取;所述200nt的RNA片段的提取包括如下步骤:1将进行总蛋白的提取时获得的flow-through和BufferAPP混匀,孵育,收集上清;2用氯仿异戊醇抽提步骤1收集的上清1次以上,并继续收集上清;3向步骤2收集的上清中的加入氯仿异戊醇和糖原,混匀,收集沉淀;4将步骤3收集的沉淀依次进行清洗、干燥、溶解,得到200nt的RNA片段;200nt的RNA片段和200nt的RNA片段共同组成totalRNA。
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百度查询: 深圳华大生命科学研究院 一种共提取total DNA、total RNA和总蛋白的方法
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