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申请/专利权人：中禾生物种业集团有限公司
摘要：本发明涉及生物基因工程技术领域，且公开了一种玉米抗丝黑穗病候选GRMZM2G172101基因编码区SNP的HRM检测方法，已鉴定丝黑穗病抗病性的21个玉米品种为材料，通过优化引物、模板浓度等重要参数来确立最适的HRM检测体系，并随机选取一部分DNA测序对HRM结果进行验证。旨在为玉米抗丝黑穗病的分子遗传改良奠定基础。
主权项：1.一种玉米抗丝黑穗病候选GRMZM2G172101基因编码区SNP的HRM检测方法，其特征在于：所述HRM检测方法包括以下步骤：1进行qPCR反应：qPCR反应为5-15μL体系，包含基因组DNA，2×EasyTaqPCRSuperMix，以及正向和反向引物，以及0.2-0.8μL的20×EvaGreen荧光染料，并加ddH2O补足至5-20μL，产物在Roche白色96孔pcr板进行。2进行PCR扩增程序为：90-98℃3-8min、90-98℃15-40s、55-62℃20-40s、70-75℃8-12S、进行40-50次循环；3PCR扩增结束后，进行高分辨率熔解曲线检测和采集：程序为90-100℃40-80s、35-45℃45-70s；60-70℃1-1.5s、95-100℃1-1.5s，熔解曲线数据收集从65-85℃温度，升温速率为0.1-0.2℃s。根据熔解曲线的变化形态来区分杂合体和双亲本的基因型。
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权利要求：
百度查询： 中禾生物种业集团有限公司 一种玉米抗丝黑穗病候选GRMZM2G172101基因编码区SNP的HRM检测方法
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