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申请/专利权人:上海植物园
摘要:本发明公开了一种基于TRV‑VIGS技术快速鉴定杜鹃花基因功能的方法,涉及林木基因工程技术领域。该方法包括以下步骤:目的基因的获得;pTRV2‑目的基因载体的构建;pTRV2‑目的基因载体、pTRV2空载、pTRV1分别转化农杆菌GV3101;含有pTRV1的侵染液分别与含有pTRV2空载、pTRV2‑目的基因的侵染液混匀静置;叶片注射法侵染材料;低温、黑暗条件下处理侵染后的杜鹃花幼苗,常规培养;未处理植株和接种空载的植株作为对照,检测被沉默基因的表达水平。本发明所述的方法具有实现简单、快速、稳定、高通量,可快速鉴定杜鹃花基因功能的优点,为规模化开展杜鹃花基因功能研究提供依据。
主权项:1.一种基于TRV-VIGS技术快速鉴定杜鹃花基因功能的方法,其特征在于,包括以下步骤:1目的基因的获得;2pTRV2-目的基因载体的构建;3pTRV2-目的基因载体、pTRV2空载、pTRV1分别转化农杆菌GV3101;4将含有pTRV1的侵染液分别与含有pTRV2空载、pTRV2-目的基因的侵染液混匀静置3h;5选择侵染材料;6叶片注射法侵染;7低温、黑暗条件下处理侵染后的杜鹃花幼苗后,常规培养;第一次侵染15-30天后,对新长出的幼嫩叶片进行二次侵染,重复步骤4、步骤6和步骤7;8未处理植株和接种空载的植株作为对照,通过荧光定量PCR检测被沉默基因的表达水平。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 上海植物园 一种基于TRV-VIGS技术快速鉴定杜鹃花基因功能的方法
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