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申请/专利权人：北京维德维康生物技术有限公司
摘要：本发明提供一种用于检测细菌中MCR‑1耐药蛋白的双抗夹心ELISA检测试剂盒及其检测方法，包括包被有单克隆抗体4E5的酶标板、检测抗体5B3‑HRP、MCR‑1蛋白标准品。本发明选用4E5作为捕获抗体，5B3‑HRP作为检测抗体研制了MCR‑1双抗夹心ELISA检测试剂盒，并对其进行了方法学系统评估，结果显示试剂盒特异性好，灵敏度高，为MCR‑1阳性耐药菌的快速检测提供了一种技术手段。
主权项：1.一种用于检测细菌中MCR-1耐药蛋白的双抗夹心ELISA检测试剂盒，其特征在于：包被有单克隆抗体4E5的酶标板、检测抗体5B3-HRP、MCR-1蛋白标准品；所述的试剂盒的方法，包括如下步骤：1包被有单克隆抗体4E5的酶标板的制备：将单克隆抗体4E5用碳酸盐缓冲液稀释成浓度为5μgmL的抗体包被液，每孔100μL，4℃包被过夜后洗板；然后每孔加入100μL封闭液，37℃、湿度30-40％封闭2h，37℃、湿度30-40％恒温干燥2h；2检测抗体稀释液：0.01MpH7.4的PBST溶液；3检测抗体工作液的制备：检测抗体5B3-HRP按照1:30000比例稀释后备用；4样品稀释液的制备：0.01MpH7.4的PBS溶液；5底物A液的制备：含0.08％过氧化脲、0.025％PEG-2000、3.58％十二水合磷酸氢二钠、0.96％一水合柠檬酸水溶液，调pH值至7.4；6底物B液的制备：含1.03％一水合柠檬酸、0.04％TMB、0.0008％硫代硫酸钠、0.1％光稳定剂292、3％DMF水溶液，调pH值至5.0；所述试剂盒中还包括终止液、封闭液和洗涤液；具体的所述终止液为3molL硫酸铵；所述封闭液为2％BSA；所述洗涤液为含0.1％Tween-20的0.01MpH7.4PBST溶液。
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权利要求：
百度查询： 北京维德维康生物技术有限公司 MCR-1耐药蛋白双抗夹心ELISA检测试剂盒及检测方法
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