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环介导切刻等温-CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法 

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申请/专利权人:复旦大学

摘要:本发明涉及环介导切刻等温‑CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组、试剂盒及方法。本发明对裂谷热病毒S基因中一个片段的设计了5条引物,并利用链置换BstDNA聚合酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,实现核酸指数扩增;利用切刻酶切刻活性和BstDNA聚合酶链置换活性生成大量单链片段。再利用Cas12a蛋白和向导RNA形成的二元复合体的模板依赖顺式切割活性介导的反式切割活性进行检测,快速、高效和准确;该技术对裂谷热病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,可以和胶体金试纸偶联实现快速实时检测,可以很好补充裂谷热病毒快速检测的方案。

主权项:1.一种环介导切刻等温扩增引物组,其特征在于,所述引物组包括:如SEQIDNO.1所示的上游外部引物F3、SEQIDNO.2所示的下游外部引物B3、SEQIDNO.3所示的上游内部引物FIP-nick、SEQIDNO.4所示的下游内部引物BIP-renick和SEQIDNO.5所示的上游环化引物LF;所述环介导切刻等温扩增引物组即作为环介导切刻等温-CRISPR联合检测裂谷热病毒的引物组。

全文数据:

权利要求:

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