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解除PTS依赖碳源对相关启动子阻遏的方法及其应用 

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申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所

摘要:本发明属于基因工程领域,具体公开了解除或降低碳分解代谢物阻遏对T7lac、T7及lac等启动子影响的方法。敲除糖酵解途径基因pgi、pfkA、tpiA或葡萄糖磷酸转移酶基因ptsG中任意一个基因能够将在含有葡萄糖的培养基中培养的大肠杆菌携带的lac及其衍生的lacUV5、lac、tac、trc、PLlacO‑1启动子活性提高1.71‑116.96倍。本发明还提供了生产维生素B12的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用,其中敲除糖酵解途径基因pgi、pfkA、tpiA或葡萄糖磷酸转移酶基因ptsG中任意一个基因后的重组菌能够在含有葡萄糖或其它PTS依赖碳源的培养基中发合成酵维生素B12。

主权项:1.一种在大肠杆菌中解除PTS依赖碳源对相关启动子阻遏的方法,其特征在于,将含有相关启动子控制表达目的基因的大肠杆菌菌株中的糖酵解途径基因tpiA被敲除或其活性降低,而在含有酵母提取物、胰蛋白胨或蛋白胨为氮源和唯一PTS依赖碳源作为碳源的培养基中发酵时,以提高相关启动子表达目的基因的强度,所述相关启动子选自下述中的一种或多种:T7lac、T7、lacUV5、lac、tac、trc和PLlacO-1启动子,且所述PTS依赖碳源是葡萄糖、果糖或甘露醇。

全文数据:

权利要求:

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