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申请/专利权人:金宇保灵生物药品有限公司
摘要:本发明涉及兽用疫苗及微生物细胞培养技术领域,尤其涉及一种提高CSFV‑E2蛋白表达量的培养基的应用。本发明所述提高CSFV‑E2蛋白表达量的培养基,以CDCHO011为基础培养基,添加8‑12mM的L‑精氨酸。该培养基能极大程度地提升细胞活率和培养后期的活细胞数量,提高CSFV‑E2蛋白的表达量。本发明在使用前述培养基发酵生产CSFV‑E2蛋白的过程中,添加CDFeed002营养补充剂,有助于降低因前期添加L‑精氨酸导致的细胞代谢产物积聚,进而减少代谢产物对细胞后期生长和蛋白表达造成的不利影响。
主权项:1.一种生产CSFV-E2蛋白的方法,其特征在于,使用培养基培养具有表达CSFV-E2蛋白功能的细胞,所述培养基以CDCHO011为基础培养基,添加8-12mM的L-精氨酸;所述CSFV-E2蛋白由SEQIDNO:1所示的核苷酸序列表达获得;在发酵生产CSFV-E2蛋白的过程中添加CDFeed002营养补充剂;在培养至第3-5天时,按照细胞初始培养体积的6-14vol%添加CDFeed002营养补充剂;在培养至第8-10天时,再次按照细胞初始培养体积的6-14vol%添加CDFeed002营养补充剂;培养至第12-14天收获培养液;所述CDCHO011培养基购买自甘肃健顺生物科技有限公司,货号:88011-317;所述CDFeed002营养补充剂购买自甘肃健顺生物科技有限公司,货号:99014-302;所述具有表达CSFV-E2蛋白功能的细胞为CHO细胞。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 金宇保灵生物药品有限公司 提高CSFV-E2蛋白表达量的培养基的应用
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