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一种沙门菌鞭毛蛋白FimH的制备方法及其在Elisa检测中的应用 

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摘要:本发明属于生物技术领域,公开了了一种沙门菌鞭毛蛋白FimH的制备及其在Elisa检测中的应用,本FimH蛋白是沙门菌的鞭毛,通过原核表达系统大肠杆菌BL21DE3进行表达,接着按照不可溶蛋白的处理方法进行亲和层析纯化,变性,再复性;并对所制备的蛋白用Bradford试剂盒进行浓度的测定。最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单,成本低,容易大批量制备,可应用于ELISA检测方法中,应用前景好。

主权项:1.一种沙门菌鞭毛蛋白FimH的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、构建重组阳性转化子:以鸡白痢沙门菌S.P376的全基因组为模板扩增目的基因FimH,将目的基因FimH与质粒载体重组,后转化筛选得到重组阳性转化子;S2、目的蛋白的表达和纯化:将重组阳性转化子菌株培养进行诱导表达,诱导后的菌体沉淀重悬至含有8M尿素的缓冲液中,经破碎、过滤后纯化;S3、透析复性:将纯化后的蛋白分别在含有6M,4M,2M,1M,0M的透析液的透析袋中进行透析,每4h换一次透析液,透析完成后即得沙门菌鞭毛蛋白FimH。

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