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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本发明公开了一种靶向FTO基因调控mRNAm6A水平进行营养素高通量筛选的技术体系。基于CRISPRknock‑in技术，构建靶向FTO基因的sgRNA‑Cas9载体和两侧包含FTO基因同源臂的mNeonGreenDNA模版质粒，利用核电转法将其转入脂肪细胞中得到FTO报告细胞，对1000种以上的营养素包括但不限于植物提取物、脂肪酸、氨基酸等多种营养素库进行高通量细胞处理，通过共聚焦高内涵成像分析系统观察mNeonGreen荧光表达，筛选得到能够调控mRNAm6A水平的营养素。本发明可用于高通量筛选调控mRNAm6A水平的营养素，对于简便、快速、高效地鉴定具有mRNAm6A水平调控活性的营养素具有重要意义。
主权项：1.一种靶向FTO基因调控mRNAm6A水平进行营养素高通量筛选的技术体系，其特征在于，基于CRISPRknock-in技术构建FTO报告细胞，基于高内涵成像筛选得到具有mRNAm6A调控活性的营养素，包括以下步骤：1小鼠原代脂肪细胞的分离和鉴定；2靶向FTO基因的sgRNA-Cas9载体和mNeonGreenDNA模版质粒的构建；3瞬时超表达FTO基因，构建FTO报告细胞；4基于高内涵成像的营养素高通量筛选。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学 一种靶向FTO基因调控mRNA m6A水平进行营养素高通量筛选的技术体系
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