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一种体外高效稳定转导抗原嵌合受体双阴性T细胞的方法 

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申请/专利权人:浙江瑞加美生物科技有限公司

摘要:本发明提供了一种安全高效的体外转导双阴性T细胞DNT的方法,以及使用所述方法制备得到的细胞和含有所述细胞的制剂。本发明在不添加转导辅助的阳离子试剂的条件下,用慢病毒转导激活和扩增的新鲜富集的或冻存后复苏的双阴性T细胞,即可获得稳定且高效的转导效率。使用本发明的方法制备得到的嵌合抗原受体‑双阴性T细胞CAR‑DNT不仅具有更高的细胞活率和纯度,保留有高杀瘤活性,且避免了CAR‑DNT细胞生产中添加阳离子转导试剂带来的高残留隐患。

主权项:一种体外转导双阴性T细胞的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:i提供未激活的双阴性T细胞DNT;ii在抗人CD3单克隆抗体存在的条件下,使用第一培养基培养所述未激活的双阴性T细胞,从而获得激活的双阴性T细胞;其中,所述抗人CD3单克隆抗体被固化在介质上;iii使用第二培养基扩增培养所述激活的双阴性T细胞,从而获得经扩增的双阴性T细胞;和iv在不添加转导辅助阳离子试剂的条件下,用MOI为1-15的慢病毒载体转导经扩增的双阴性T细胞,从而获得经转导的双阴性T细胞;其中,所述慢病毒载体载有外源性基因序列。

全文数据:

权利要求:

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