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申请/专利权人：郑州大学第一附属医院
摘要：本发明涉及条件性敲除kcnj16钾离子通道基因的转基因小鼠的培育方法，可有效解决作为动物模型，适用于不同组织器官中研究kcnj16的作用问题，其解决的技术方案是，通过基因工程技术对C57小鼠进行基因改造，构建出FLOX‑Kcnj16转基因小鼠，此小鼠可与多种不同器官带有cre酶的转基因小鼠杂交，得到在不同器官中降低kcnj16表达水平的小鼠，本发明培育方法科学，所培育的小鼠可直接应用于不同的疾病模型中，为明确kcnj16在不同组织器官中的作用提供了非常好的动物模型，特别是为糖尿病的诊断治疗提供技术支持，而且准确率高，是诊断疾病动物模型上的创新。
主权项：1.一种条件性敲除kcnj16钾离子通道基因的转基因小鼠的培育方法，其特征在于，通过基因工程技术对C57小鼠进行基因改造，构建出FLOX-Kcnj16转基因小鼠，此小鼠可与多种不同器官带有cre酶的转基因小鼠杂交，得到在不同器官中降低kcnj16表达水平的小鼠，具体包括以下步骤：1）构建载体构建Kcnj16条件敲除载体，Kcnj16基因，删除该区域应导致小鼠Kcnj16基因功能丧失；将C57BL6小鼠基因文库中的BAC克隆作为模板，进行PCR，获得试验所需要的目的载体及敲除区域；在目的载体中，Neo位点旁插入自删除锚定位点，基因敲除区域旁插入loxP位点，DTA用于阴性选择；与Cre酶介导的基因重组后，得构建成功的基因敲除质粒载体；2）基因动物打靶培育：将C57BL6ES细胞用于基因打靶，也就是将基因敲除质粒载体导入ES细胞中，进行后续繁育，与多种不同器官带有Cre酶的转基因小鼠杂交，得到在不同器官中降低Kcnj16表达水平的阳性小鼠。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 郑州大学第一附属医院 条件性敲除kcnj16钾离子通道基因的转基因小鼠的培育方法
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