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申请/专利权人：广州达安基因股份有限公司

摘要：本发明公开了一种基于荧光PCR‑HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒。本发明设计获得了一组用于分型检测脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、戈登分枝杆菌和龟分枝杆菌的PCR‑HRM引物和分子信标探针。在此基础上，本发明提供了一种检测特异性好、灵敏度高、重复性好的基于荧光PCR‑HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒，通过3管反应体系即可一次性对上述分枝杆菌进行分型检测，且检测步骤简单，耗费时间短，检测结果准确，可用于常见非结核分枝杆菌的分型检测，有助于区别诊断非结核分枝杆菌肺病和结核病，针对所感染的病原体进行及时、正确的治疗。

主权项：1.一种基于荧光PCR-HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有反应液A1、反应液A2和反应液A3；其中，所述反应液A1中含有用于检测脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；所述反应液A2中含有用于检测蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；所述反应液A3中含有用于检测戈登分枝杆菌和龟分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；所述用于检测脓肿分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.4～6所示；所述用于检测偶发分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.7～9所示；所述用于检测堪萨斯分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.10～12所示；所述用于检测蟾蜍分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.13～15所示；所述用于检测鸟分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.16～18所示；所述用于检测胞内分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.19～21所示；所述用于检测戈登分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.22～24所示；所述用于检测龟分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针的核苷酸序列依次如SEQIDNO.25～27所示；上述同种反应液中的不同探针的5’端标记有不同的荧光发射基团，3’端标记有淬灭基团。

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