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CRISPR/Cas9植物基因组多靶点编辑载体及其应用 

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申请/专利权人:中国农业科学院生物技术研究所

摘要:本发明公开了CRISPRCas9植物基因组多靶点编辑载体及其应用。所述编辑载体的sgRNA表达盒为2个或2个以上串联在一起;sgRNA表达盒由植物内源U6启动子驱动表达;结合tRNA系统,每个sgRNA表达盒可串联2个或2个以上靶向植物基因的靶标序列sgRNA。本发明进一步提供了对紫花苜蓿MsTFL1s基因进行编辑的CRISPRCas9多靶点编辑载体,包括3个串联的sgRNA表达盒,由3个高表达的紫花苜蓿内源U6启动子驱动表达了基于tRNA‑sgRNA系统串联的9个靶向紫花苜蓿MsTFL1s基因的sgRNA靶标序列,同时改进优化了载体构建方法,实现对紫花苜蓿基因组高效、多靶点的基因编辑。

主权项:1.一种CRISPRCas9植物基因组多靶点编辑载体,包括sgRNA表达盒和Cas9表达盒;其特征在于,所述的sgRNA表达盒为2个或2个以上且sgRNA表达盒串联在一起;每个sgRNA表达盒的组成元件包括紫花苜蓿内源U6启动子、靶向植物基因的靶标序列sgRNA和终止子;所述靶向植物基因的靶标序列sgRNA的数量为2个或2个以上且采用tRNA将每个靶标序列sgRNA串联在一起。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业科学院生物技术研究所 CRISPR/Cas9植物基因组多靶点编辑载体及其应用

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