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申请/专利权人:武汉承启医学检验实验室有限公司
摘要:本申请属于生物试剂技术领域,具体公开一种用于保护血液中游离DNA的保护剂,其特征在于,每100ml所述保护剂包括如下组分:乙二胺四乙酸二钠5‑12g,茶多酚0.8‑1.5g,蛋白酶K2‑8g,枸杞提取物2.5‑4.5g,余量为缓冲液。本申请至少具有以下有益效果之一:本申请提供的保护剂能够用于保护血液中游离DNA,防止游离DNA的降解,也能够防止基因组DNA降解而污染游离的DNA,而且本申请提供的cfDNA保护剂成分简单,来源广泛,不含有害成分,对环境友好,成本低,适用于大规模的工业化生产及推广。
主权项:1.一种用于保护血液中游离DNA的保护剂,其特征在于,每100ml所述保护剂包括如下组分:乙二胺四乙酸二钠8-10g,茶多酚1.0-1.2g,蛋白酶K4-6g,枸杞提取物3-4g,余量为缓冲液;每100ml所述保护剂中还包括甘油2-5mL;所述保护剂的制备方法包括如下步骤:S1:将乙二胺四乙酸二钠,茶多酚和枸杞提取物加入到缓冲液中混合均匀;S2:再将蛋白酶加入到缓冲液中混合均匀,再加入甘油混合均匀;所述缓冲液为0.05mollTris-HCl缓冲液、0.2moll磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液或1×PBS缓冲液中的一种,且所述缓冲液的pH值为7.5;所述枸杞提取物的制备方法如下:1)取新鲜的枸杞果实清洗,破碎后打浆;过筛80目筛,收集果汁;2)将果汁加热至45℃,调节pH值为4.0,然后按照果汁的重量加入0.04%的果胶酶,混合均匀,静置0.5h后,过滤收集滤液;3)按照滤液的重量加入0.5%的活性炭进行搅拌吸附,过滤收集滤液;4)向步骤3)的滤液中加入滤液重量0.05%的木瓜蛋白酶搅拌1h,然后加入滤液重量0.2%的三氯乙酸充分搅拌后,过滤收集滤液;5)在-0.8Mpa,温度为55℃条件下蒸发步骤4)所获得的滤液得到浓缩液;6)向浓缩液中加入浓缩液重量2%的活性炭搅拌0.5h后静置,过滤取滤液;7)向步骤6)中的滤液中加入5倍体积95%的乙醇,搅拌0.5h后静置,过滤收集沉淀物,真空干燥,制得所述枸杞提取物。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 武汉承启医学检验实验室有限公司 一种用于保护血液中游离DNA的保护剂
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