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一种能够提取细胞基因组超长片段的试剂盒及其使用方法 

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申请/专利权人:四川大学华西医院

摘要:本发明提供了一种能够提取细胞基因组超长片段的试剂盒及其使用方法,以玻璃珠作为DNA吸附珠,针对性调整裂解液和缓冲溶液的成分和浓度,在高pH和高盐缓冲液中,玻璃表面的二氧化硅可带有负电荷,而DNA分子的磷酸基团也带有负电荷。高盐环境下的阳离子就会以盐桥的方式将二者联接在一起,使得DNA吸附于珠子表面;当缓冲液中的盐浓度较低时,离子强度减小,离子强度的减小减弱了DNA与珠子表面之间的静电吸引力。因此,在低盐浓度下,吸附在珠子表面的DNA相对较容易被洗脱。采用此试剂盒提取细胞基因组,能够保证基因组DNA的完整性和高纯度性,减少机械损伤。

主权项:1.一种能够提取细胞基因组超长片段的试剂盒,其特征在于,包括以下组分:核准备溶液:物质A:10±2mM的Tris-HCl,10±2mM的NaCl,3±1mM的MgCl2,1±0.5mM的EDTA,0.1-2%NP-40,水;物质B:核糖核酸酶A;物质A和物质B的重量比为330:10~12;核裂解液:物质C:10±2mM的Tris-HCl,10±2mM的NaCl,1±0.5mM的EDTA,0.5-2%SDS,水;物质D:蛋白酶K;物质C和物质D的体积比为330:20~24;降水增强剂:0.2-1M的NaCl;DNA分子沉淀剂:质量浓度为40-60%的异丙醇;洗涤缓冲液:质量浓度为60%~70%的乙醇;洗脱缓冲液:10±2mM的Tris-HCl,1±0.5mM的EDTA,水。

全文数据:

权利要求:

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