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申请/专利权人：沈阳农业大学
摘要：本发明属于植物遗传转化技术领域，具体公开了一种芍药属植物种子瞬时表达外源基因的方法，以芍药属植物种子为材料，通过适当的消毒处理和负压处理，将外源基因转入胚乳中，使其通过自身的生长代谢来使目的基因进行表达，可通过GUS染色验证、qRT‑PCR实时荧光定量、克隆报告基因三种方法验证目的基因是否转入，再通过观察胚萌发来完成外源基因的功能鉴定，此方法材料容易获取、成本低，且操作设备简单、耗时短，能够有效缩短芍药属植物外源基因功能鉴定的时间。
主权项：1.一种芍药属植物种子瞬时表达外源基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、挑选大而饱满的芍药属植物种子清水浸泡48h，去除种皮并将种胚切成约3mm3的块状体，进行消毒处理后用无菌注射器针头形成伤口；S2、将种子完全浸没到OD600值为0.8-1.0的预设转化液后进行持续时间的负压处理；S3、将浸泡后的目标种子接入固体共培养基中，所述固体共培养基由MS、AS、蔗糖和琼脂组成，其中每升中加入MS4.74g、蔗糖30g、AS100μM、和琼脂6.5g，pH为5.7；在25℃黑暗条件下培养36-48h，得到培养后的目标种子；S4、将培养后的目标种子从固体共培养基中取出，进行消毒处理后去除胚乳，将种胚接种至固体萌发培养基中，所述固体萌发培养基，由MS、GA3、Cef和琼脂组成，其中每升中加入MS4.74g、GA30.5mg、Cef300mg和琼脂6.5g，pH为5.7；25℃培养3-7d后观察萌发情况，完成外源基因的功能鉴定。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 沈阳农业大学 一种芍药属植物种子瞬时表达外源基因的方法
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