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申请/专利权人:珠海高瑞特医疗科技有限公司
摘要:本发明公开了一种精浆谷胱甘肽过氧化物酶活性的定量测定方法及试剂盒,包括:取精液标本,离心,取上清液于离心管中,得到精浆标本,向精浆标本中加入试剂1以及试剂2,混匀,测定吸光度值A测定1,其中,试剂1为包括还原型谷胱甘肽、EDTA‑Na2以及叠氮钠的磷酸盐缓冲液,试剂2为包括谷胱甘肽还原酶以及NADPH的磷酸盐缓冲液;向所述精浆标本中加入试剂3,混匀,反应,测定吸光度值A测定2,其中试剂3为包括异丙苯过氧化氢的磷酸盐缓冲液;同样步骤得到空白对照组,测定吸光度值A空白1,再加入试剂3,混匀,反应,测定吸光度值A空白2;将测定值通过以下公式进行计算:GSH‑Px活性nmolminmL=[△A测定‑△A空白÷ε÷d×V总×106]÷V样÷T。
主权项:1.一种精浆谷胱甘肽过氧化物酶活性的定量测定方法,其特征在于,包括步骤如下:步骤一:取精液标本,离心,取上清液于离心管中,得到精浆标本,向所述精浆标本中加入试剂1及试剂2,混匀,测定吸光度值A测定1,其中,所述试剂1为包括还原型谷胱甘肽、EDTA-Na2以及叠氮钠的磷酸盐缓冲液,所述试剂2为包括谷胱甘肽还原酶以及NADPH的磷酸盐缓冲液;步骤二:向上述反应液中加入试剂3,混匀,反应,测定吸光度值A测定2,其中所述试剂3为包括异丙苯过氧化氢的磷酸盐缓冲液;步骤三:取与所述精浆标本等量蒸馏水,同样加入所述试剂1与所述试剂2,混匀,测定吸光度值A空白1,再加入所述试剂3,混匀,反应,测定吸光度值A空白2;步骤四:将测定值通过以下公式进行计算,所述公式为:GSH-Px活性nmolminmL=[△A测定-△A空白÷ε÷d×V总×106]÷V样÷T,其中,△A测定=A测定2-A测定1;△A空白=A空白2-A空白1;ε为NADPH摩尔消光系数,为6.22×103Lmolcm,V总为反应体系总体积,V样为加入反应体系中的样品体积,d为光径。
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权利要求:
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