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申请/专利权人：三亚热带水产研究院
摘要：本发明涉及人工受精领域，其具体是一种华贵栉孔扇贝人工受精方法，通过采用整体性腺的冷冻保存方法，与传统的单独精子冷冻保存方法相比，这种方法能够更有效地保持精子的生物活性和自然状态，因为它保留了精子在扇贝体内的自然环境，这种整体性腺的冷冻方式减少了精子在冷冻和解冻过程中的损伤，显著提高了解冻后精子的存活率和质量；本发明使用的冷冻保护液含有特定比例的渗透性和非渗透性抗冻剂，如DMSO和海藻糖，这种独特配方能更有效地保护精子免受冷冻伤害，同时模拟精子在扇贝体内的自然环境，提高其在解冻后的活性和存活率。
主权项：1.一种华贵栉孔扇贝人工受精方法，其特征在于，包括：S1，挑选处于繁殖盛期、性腺饱满的华贵栉孔扇贝个体，用刀片切开贝壳，用无菌手术刀切开一侧闭壳肌，暴露内脏团；S2，将性腺剥离取下，并用吸水纸吸干海水及组织液混合物；S3，在无菌载玻片上滴海水，挑取性腺中的乳白色物质进行观察，以确定生殖细胞类型；S4，制备冷冻保护液，冷冻保护液按重量比计包括：HBSS溶液80-90%、DMSO4-8%和0.25molL海藻糖5-10%，其中HBSS溶液中不含钙离子和镁离子，不含酚红；S5，将性腺按1：20的重量比例与冷冻保护液混合，然后在4℃下平衡30分钟；S6，使用程序降温仪对混合物进行冷冻处理，包括从4℃降至﹣25℃，平衡后再降至﹣80℃，最后快速转移到液氮罐中保存；具体是，使用程序降温仪将混合物以3-6℃min的速率降至﹣25℃，在﹣25℃平衡3-6min，再以7-12℃min的速率降至﹣80℃，在﹣80℃平衡3-6min，将混合物快速转移到液氮罐中进行保存；S7，从液氮罐中取出样本，并在30-60℃恒温水浴中解冻；S8，对解冻后的性腺进行处理，包括吸干、剪碎、冲洗过滤，最终获得激活的20倍稀释的精子；S9，使用精子质量分析仪记录精子存活率，确保精子活力达60%以上；S10，准备处于适合受精状态的华贵栉孔扇贝卵子，将激活的精子与卵子混合，在控制的环境条件下促使混合物进行受精，观察和确认受精的成功，表现为受精卵的形成和发育。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 三亚热带水产研究院 一种华贵栉孔扇贝人工受精方法
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