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申请/专利权人：河北维达康生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种以葡萄糖为底物生物合成甘草次酸的解脂耶氏酵母工程菌株、构建及应用，属于生物技术领域。该工程菌株在基因组上整合了β‑香树脂醇合酶表达模块、1130位‑氧化‑β‑香树脂醇酶表达模块、细胞P450氧化酶表达模块和细胞色素P450还原酶表达模块；其构建步骤为：构建得到甘草次酸生物合成模块质粒：β‑香树脂醇合成酶bAS，细胞色素P450氧化酶88D6CYP88D6，11位30位‑氧化‑β‑香树脂醇酶CYP725A4，细胞色素P450还原酶CPR，将甘草次酸生物合成模块整合至解脂耶氏酵母工具质粒上，将整合了甘草次酸生物合成模块的质粒线性化后导入解脂耶氏酵母中，得到基因组上整合了甘草次酸生物合成模块的解脂耶氏酵母工程菌。本发明的工程菌株生产甘草次酸产量显著提高，最高达到7gL。
主权项：1.一种生产甘草次酸的解脂耶氏酵母工程菌株，其特征在于：解脂耶氏酵母工程菌基因组中整合了bAS，CYP88D6，CYP725A4，CPR基因，具有以葡萄糖为底物，从β-香树脂醇，经11位-β-香树脂醇、30位羟基-11位氧化香树脂醇合成甘草次酸的能力，所述的解脂耶氏酵母工程菌株的基因组上敲除羊毛甾醇合酶位点ERG7，在该位点整合表达角鲨烯氧化酶ERG1和角鲨烯合酶ERG9，所述的解脂耶氏酵母工程菌株的基因组上过表达截短的羟甲基戊二酸还原酶trHMGR和羟甲基戊二酸合成酶HMGS；其中截短的羟甲基戊二酸还原酶trHMGR的截短范围为蛋白质N端前300-500个氨基酸序列，所述的解脂耶氏酵母工程菌株的基因组上整合有细胞色素b5，所述的细胞色素b5基因序列如SEQIDNO.9所示，来源于灰色锥虫。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 河北维达康生物科技有限公司 一种以葡萄糖为底物生物合成甘草次酸的解脂耶氏酵母工程菌株、构建及其应用
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