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申请/专利权人:河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所;河北缘生农业开发有限公司
摘要:本发明涉及一种延长小麦花药保存时间的方法,具体为当小麦挑旗以后,在小麦穗顶端露出旗叶鞘之前的1~2天内进行取材,在穗下第二节处将小麦穗取下,保留上部2~3个叶片,取材在晴天的10:00~12:00或16:00~18:00进行,先将小麦穗插入硫酸纸袋中,再用另一个硫酸纸袋封口,然后装入塑料袋中,封口后装入带有通气孔和透光顶盖的保存盒中,置于温度为1~7.7℃,相对湿度为75%~100%的冷藏箱中储存,储存期间每天保持光暗交替,本发明的保存技术可以使小麦花药保存2个月以上,仍然具有诱导出愈伤组织的活力,通过延长接种时间可以有效解决大量接种花药的问题,对于利用小麦花药培养的单倍体育种工作具有重要的现实意义。
主权项:1.一种延长小麦花药保存时间的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1取穗:当小麦挑旗以后,在小麦穗顶端露出旗叶鞘之前的1~2天内进行取材,在穗下第二节处将小麦穗取下,保留上部2~3个叶片,取穗时间在晴天的10:00~12:00或16:00~18:00进行;S2包装:将S1取下的小麦穗沿麦穗长度方向放入硫酸纸袋中,再用另一硫酸纸袋插套封口,将套好的硫酸纸袋放入塑料袋中,塑料袋封口后放入带有通气口的保存盒中,保存盒顶部可透光;S3保存:将保存盒置于温度为1~7.7℃,相对湿度为75%~100%的冷藏箱中储存,储存期间每天保持光暗交替;S4花药培养:将小麦穗取出,在22~25℃的环境温度条件下放置15~20min,将小麦叶片剪掉,从穗下节处截断,用75%的酒精对小麦旗叶鞘进行表面消毒3~5次,在超净工作台内放5分钟后,剥出麦穗接种花药到诱导培养基,诱导培养,先在30℃暗培养2天,然后在28℃暗培养直到长出愈伤组织;所述步骤S2中小麦穗的长度长于硫酸纸袋的长度;所述步骤S3中,光暗交替为13~14h散射光照,11~10h黑暗;所述步骤S4中诱导培养基配方为:KCl1.475gL,KH2PO40.1gL,MgSO4.7H2O0.175gL,CaCl2.2H2O0.205gL,NH4NO30.1gL,MS微量元素,MS铁盐,B5有机成分,L-谷氨酰胺0.87gL,L-天门冬氨酸0.266gL,L-精氨酸0.174gL,甘氨酸7.5mgL,蔗糖30gL,2,4-D2.5mgL,KT0.5mgL,植物凝胶2.4gL,葡萄糖35gL,pH5.8。
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