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申请/专利权人：河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所;河北缘生农业开发有限公司

摘要：本发明涉及一种延长小麦花药保存时间的方法，具体为当小麦挑旗以后，在小麦穗顶端露出旗叶鞘之前的1～2天内进行取材，在穗下第二节处将小麦穗取下，保留上部2～3个叶片，取材在晴天的10:00～12:00或16:00～18:00进行，先将小麦穗插入硫酸纸袋中，再用另一个硫酸纸袋封口，然后装入塑料袋中，封口后装入带有通气孔和透光顶盖的保存盒中，置于温度为1～7.7℃，相对湿度为75％～100％的冷藏箱中储存，储存期间每天保持光暗交替，本发明的保存技术可以使小麦花药保存2个月以上，仍然具有诱导出愈伤组织的活力，通过延长接种时间可以有效解决大量接种花药的问题，对于利用小麦花药培养的单倍体育种工作具有重要的现实意义。

主权项：1.一种延长小麦花药保存时间的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1取穗：当小麦挑旗以后，在小麦穗顶端露出旗叶鞘之前的1~2天内进行取材，在穗下第二节处将小麦穗取下，保留上部2~3个叶片，取穗时间在晴天的10:00~12:00或16:00~18:00进行；S2包装：将S1取下的小麦穗沿麦穗长度方向放入硫酸纸袋中，再用另一硫酸纸袋插套封口，将套好的硫酸纸袋放入塑料袋中，塑料袋封口后放入带有通气口的保存盒中，保存盒顶部可透光；S3保存：将保存盒置于温度为1~7.7℃，相对湿度为75%~100%的冷藏箱中储存，储存期间每天保持光暗交替；S4花药培养：将小麦穗取出，在22~25℃的环境温度条件下放置15~20min，将小麦叶片剪掉，从穗下节处截断，用75%的酒精对小麦旗叶鞘进行表面消毒3~5次，在超净工作台内放5分钟后，剥出麦穗接种花药到诱导培养基，诱导培养，先在30℃暗培养2天，然后在28℃暗培养直到长出愈伤组织；所述步骤S2中小麦穗的长度长于硫酸纸袋的长度；所述步骤S3中，光暗交替为13~14h散射光照，11~10h黑暗；所述步骤S4中诱导培养基配方为：KCl1.475gL，KH2PO40.1gL，MgSO4.7H2O0.175gL，CaCl2.2H2O0.205gL，NH4NO30.1gL，MS微量元素，MS铁盐，B5有机成分，L-谷氨酰胺0.87gL，L-天门冬氨酸0.266gL，L-精氨酸0.174gL，甘氨酸7.5mgL，蔗糖30gL，2,4-D2.5mgL，KT0.5mgL，植物凝胶2.4gL，葡萄糖35gL，pH5.8。

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