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申请/专利权人:上海雄图生物科技有限公司;无锡精检生物技术有限公司
摘要:本发明涉及一种跨物种的多个病原体复合扩增体系及检测试剂盒。所述复合扩增体系能从多动物来源的混合样本中最多同时扩增出6种经济动物猪、牛、羊、鸡、鸭和鹅,共38种动物病原体的核酸片段。所述动物病原体包括猪病病原体16种,反刍动物病病原体7种,以及禽病病原体15种。含有所述复合扩增体系的检测试剂盒使得本领域技术人员获得一种单次检测动物种类及病种多、准确度高、检测速度快、操作简便的动物病原体检测方法,从而克服现有技术中的局限性,满足畜禽养殖企业、动物疫病防控部门及科研院所等单位的需要。
主权项:1.一种复合扩增体系,其特征在于,包括引物组合和复合扩增PCRMIX,所述引物组合靶向扩增38种动物病原体的核酸片段,包括:特异性扩增猪水疱病病毒的引物对F1和R1,所述F1的核苷酸序列如SEQIDNo:1所示,所述R1的核苷酸序列如SEQIDNo:2所示;特异性扩增非洲猪瘟病毒的引物对F2和R2,所述F2的核苷酸序列如SEQIDNo:3所示,所述R2的核苷酸序列如SEQIDNo:4所示;特异性扩增口蹄疫病毒的引物对F3和R3,所述F3的核苷酸序列如SEQIDNo:5所示,所述R3的核苷酸序列如SEQIDNo:6所示;特异性扩增猪瘟病毒的引物对F4和R4,所述F4的核苷酸序列如SEQIDNo:7所示,所述R4的核苷酸序列如SEQIDNo:8所示;特异性扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物对F5和R5,所述F5的核苷酸序列如SEQIDNo:9所示,所述R5的核苷酸序列如SEQIDNo:10所示;特异性扩增猪流行性腹泻病毒的引物对F6和R6,所述F6的核苷酸序列如SEQIDNo:11所示,所述R6的核苷酸序列如SEQIDNo:12所示;特异性扩增猪伪狂犬病毒的引物对F7和R7,所述F7的核苷酸序列如SEQIDNo:13所示,所述R7的核苷酸序列如SEQIDNo:14所示;特异性扩增猪圆环病毒2型的引物对F8和R8,所述F8的核苷酸序列如SEQIDNo:15所示,所述R8的核苷酸序列如SEQIDNo:16所示;特异性扩增猪圆环病毒3型的引物对F9和R9,所述F9的核苷酸序列如SEQIDNo:17所示,所述R9的核苷酸序列如SEQIDNo:18所示;特异性扩增猪轮状病毒的引物对F10和R10,所述F10的核苷酸序列如SEQIDNo:19所示,所述R10的核苷酸序列如SEQIDNo:20所示;特异性扩增猪传染性胃肠炎病毒的引物对F11和R11,所述F11的核苷酸序列如SEQIDNo:21所示,所述R11的核苷酸序列如SEQIDNo:22所示;特异性扩增猪流感病毒的引物对F12和R12,所述F12的核苷酸序列如SEQIDNo:23所示,所述R12的核苷酸序列如SEQIDNo:24所示;特异性扩增猪细小病毒的引物对F13和R13,所述F13的核苷酸序列如SEQIDNo:25所示,所述R13的核苷酸序列如SEQIDNo:26所示;特异性扩增猪肺炎支原体的引物对F14和R14,所述F14的核苷酸序列如SEQIDNo:27所示,所述R14的核苷酸序列如SEQIDNo:28所示;特异性扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的引物对F15和R15,所述F15的核苷酸序列如SEQIDNo:29所示,所述R15的核苷酸序列如SEQIDNo:30所示;特异性扩增副猪嗜血杆菌的引物对F16和R16,所述F16的核苷酸序列如SEQIDNo:31所示,所述R16的核苷酸序列如SEQIDNo:32所示;特异性扩增布鲁氏菌的引物对F17和R17,所述F17的核苷酸序列如SEQIDNo:33所示,所述R17的核苷酸序列如SEQIDNo:34所示;特异性扩增牛病毒性腹泻病毒的引物对F18和R18,所述F18的核苷酸序列如SEQIDNo:35所示,所述R18的核苷酸序列如SEQIDNo:36所示;特异性扩增牛传染性鼻气管炎病毒的引物对F19和R19,所述F19的核苷酸序列如SEQIDNo:37所示,所述R19的核苷酸序列如SEQIDNo:38所示;特异性扩增牛生殖道弯曲杆菌的引物对F20和R20,所述F20的核苷酸序列如SEQIDNo:39所示,所述R20的核苷酸序列如SEQIDNo:40所示;特异性扩增牛传染性胸膜肺炎丝状支原体的引物对F21和R21,所述F21的核苷酸序列如SEQIDNo:41所示,所述R21的核苷酸序列如SEQIDNo:42所示;特异性扩增小反刍兽疫病毒的引物对F22和R22,所述F22的核苷酸序列如SEQIDNo:43所示,所述R22的核苷酸序列如SEQIDNo:44所示;特异性扩增羊痘病毒的引物对F23和R23,所述F23的核苷酸序列如SEQIDNo:45所示,所述R23的核苷酸序列如SEQIDNo:46所示;特异性扩增禽流感病毒的引物对F24和R24,所述F24的核苷酸序列如SEQIDNo:47所示,所述和R24的核苷酸序列如SEQIDNo:48所示;特异性扩增新城疫病毒的引物对F25和R25,所述F25的核苷酸序列如SEQIDNo:49所示,所述R25的核苷酸序列如SEQIDNo:50所示;特异性扩增禽传染性支气管炎病毒的引物对F26和R26,所述F26的核苷酸序列如SEQIDNo:51所示,所述R26的核苷酸序列如SEQIDNo:52所示;特异性扩增禽传染性喉气管炎病毒的引物对F27和R27,所述F27的核苷酸序列如SEQIDNo:53所示,所述R27的核苷酸序列如SEQIDNo:54所示;特异性扩增禽传染性法氏囊病毒的引物对F28和R28,所述F28的核苷酸序列如SEQIDNo:55所示,所述R28的核苷酸序列如SEQIDNo:56所示;特异性扩增鸡传染性贫血病毒的引物对F29和R29,所述F29的核苷酸序列如SEQIDNo:57所示,所述R29的核苷酸序列如SEQIDNo:58所示;特异性扩增禽白血病病毒的引物对F30和R30,所述F30的核苷酸序列如SEQIDNo:59所示,所述R30的核苷酸序列如SEQIDNo:60所示;特异性扩增鸡白痢沙门氏杆菌的引物对F31和R31,所述F31的核苷酸序列如SEQIDNo:61所示,所述R31的核苷酸序列如SEQIDNo:62所示;特异性扩增鸡毒支原体的引物对F32和R32,所述F32的核苷酸序列如SEQIDNo:63所示,所述R32的核苷酸序列如SEQIDNo:64所示;特异性扩增鸡滑液囊支原体的引物对F33和R33,所述F33的核苷酸序列如SEQIDNo:65所示,所述R33的核苷酸序列如SEQIDNo:66所示;特异性扩增禽呼肠孤病毒的引物对F34和R34,所述F34的核苷酸序列如SEQIDNo:67所示,所述R34的核苷酸序列如SEQIDNo:68所示;特异性扩增鸭瘟病毒的引物对F35和R35,所述F35的核苷酸序列如SEQIDNo:69所示,所述R35的核苷酸序列如SEQIDNo:70所示;特异性扩增鸭肝炎病毒的引物对F36和R36,所述F36的核苷酸序列如SEQIDNo:71所示,所述R36的核苷酸序列如SEQIDNo:72所示;特异性扩增小鹅瘟病毒的引物对F37和R37,所述F37的核苷酸序列如SEQIDNo:73所示,所述R37的核苷酸序列如SEQIDNo:74所示;特异性扩增禽巴氏杆菌的引物对F38和R38,所述F38的核苷酸序列如SEQIDNo:75所示,所述R38的核苷酸序列如SEQIDNo:76所示。
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