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申请/专利权人：武汉市第三医院
摘要：本发明公开了一种确定高糖微环境下抑制细胞迁移的趋化因子及机制的方法，包括：获取糖尿病足创缘皮肤组织或急性足背外伤创缘皮肤组织；对所述组织进行单细胞转录组测序，分析成纤维细胞亚群和角质形成细胞亚群间的趋化因子受配体相互作用；制备成纤维细胞条件培养基；用所述条件培养基处理角质形成细胞，检测细胞迁移能力；检测所述条件培养基中趋化因子CXCL12的表达水平；在所述条件培养基中添加外源性CXCL12,检测角质形成细胞中CXCR4的表达及迁移能力。结果表明，高糖环境可通过下调趋化因子及其受体的表达来抑制细胞迁移，从而影响组织修复和疾病进程。本方法有助于理解高糖环境下细胞行为的调控机制，为相关疾病的预防和治疗提供理论基础。
主权项：1.一种确定高糖微环境下抑制细胞迁移的趋化因子及机制的方法，其特征在于，包括：S100、获取糖尿病足创缘皮肤组织和急性足背外伤创缘皮肤组织；S200、对所述糖尿病足创缘皮肤组织和急性足背外伤创缘皮肤组织进行单细胞转录组测序，分析其中成纤维细胞亚群和角质形成细胞亚群间趋化因子受配体的相互作用；S300、制备成纤维细胞条件培养基，其中成纤维细胞在高糖环境下培养，常规培养液培养的细胞上清液作为对照组；S400、用所述成纤维细胞条件培养基处理角质形成细胞，检测角质形成细胞的细胞迁移能力；S500、使用Luminex液相悬浮芯片检测所述条件培养基中细胞因子和趋化因子的水平、通过qPCR检测HFF细胞中趋化因子的mRNA表达，以及通过蛋白质印迹法检测CXCR4蛋白的表达变化；S600、在所述条件培养基中添加外源性CXCL12，检测角质形成细胞中CXCR4的表达及迁移能力；S700、对上述实验所得数据进行分析，确定高糖环境影响细胞行为的机制，以及CXCL12趋化因子在其中的作用。
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百度查询： 武汉市第三医院 确定高糖微环境下抑制细胞迁移的趋化因子及机制的方法
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