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一种用于生物大分子纯化的离心萃取工艺及固相萃取剂 

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申请/专利权人:无锡萃纯生物材料科技有限公司

摘要:本发明提供了一种生物大分子纯化工艺,及固相萃取剂。该工艺包括:步骤S1,固相萃取剂的制备;S2,生物大分子料液调配,S3,目标分子吸附及捕获,S4,目标分子缓冲液洗涤,S5,目标分子洗脱与分步洗脱,S6,固相萃取剂的再生。本发明能够通过逆流,回流,并流,分流等工艺达到固相萃取剂发挥最佳性能,从生物大分子母液中提取纯度更高的多种产品。

主权项:1.一种用于生物大分子纯化的离心萃取工艺,其步骤如下,固相萃取剂制作,生物大分子料液调配,目标分子吸附及捕获,目标分子缓冲液洗涤,目标分子洗脱与分步洗脱,固相萃取剂的再生;所述固相萃取剂为有机聚合物微球和多糖微球或包覆有机聚合物微球,微球具有亲水性,不与生物大分子产生排斥作用,可以为实心球也可以为空心球;所述有机聚合物微球,所述有机聚合物包括以下聚合物:丙烯酸聚合物,苯乙烯聚合物,聚乳酸,聚乙烯醇,甲基丙烯酸聚合物,尼伦类聚合物,甲基丙烯酸缩水甘油醚聚合物,环氧类聚合物,或除上述以外其他的塑料及橡胶类聚合物;具体的离心萃取工艺如下:S1、生物大分子料液配制:料液配制应该选择与其对应的层析工艺料液相同,即有着相同的缓冲溶液,盐浓度及其他保持生物大分子活性的必备物质基础;生物大分子的浓度可以根据固体萃取剂的量来选择;一般选择为层析吸附法的120%~150%;S2、目标分子的吸附与捕获:首先把固体萃取剂加入到萃取离心机中,不断的喷入缓冲溶液,以达到保证生物大分子活性的条件,对应层析工艺为缓冲步骤;上面步骤完成之后经过低速离心将缓冲液分离出来,将配制好的料液加入萃取离心机中,进行吸附和捕获目标分子,待捕获完成后进行低速离心或者切向流过滤,达到固液分离的效果;此步骤对应层析工艺中的上样;S3、目标分子洗涤:往萃取离心机中加入洗涤液,所述洗涤液与对应的层析工艺相同,将洗涤液加入萃取离心机中充分洗涤排除洗涤余液,可以采用一次洗涤,也可以多次洗涤,也可以采用不同浓度的洗涤液进行洗涤,以达到提纯或捕获的目的;S4、目标分子洗脱与分步洗脱:往萃取离心机中加入洗脱液,洗脱液与对应的层析工艺相同,将洗脱液和吸附生物大分子充分混合,收集洗脱余液,即为目标分子,可以采用梯度洗脱、等度洗脱或者阶梯洗脱;S5、固相萃取剂再生,与所对应的层析工艺的再生液相同,能够重复使用6-8次;以上步骤为一种用于生物大分子的离心萃取工艺的方式,此方式为构成离心萃取工艺的主要单元,即单级萃取。

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