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申请/专利权人：北京林业大学;中国林木种子集团有限公司;中林(三明)林业发展有限公司

摘要：本发明公开了一种基于非靶向代谢组学筛选鉴定轻木叶片中三种植物激素的方法，属于代谢组学技术检测方法技术领域。本发明公开的一种基于非靶向代谢组学筛选鉴定轻木叶片中三种植物激素的方法，包括以下步骤：样品制备与提取、数据挖掘与处理、植物激素的筛选鉴定与定量分析。通过UPLC‑Q‑Exactive‑MS的技术实现了轻木叶片中植物激素的检测，通过多组样本的多元统计分析，实现了特征代谢物的挖掘及定量分析；本发明方法准确度更高、检测结果可靠、重复性好，为轻木叶片激素检测提供了相关依据。

主权项：1.一种基于非靶向代谢组学筛选鉴定轻木叶片中三种植物激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1样品制备与提取：分别称取轻木幼苗时期、一年生、三年生、五年生的叶片样品，制备上清液；2原始数据获得：上清液进行超高效液相色谱质谱仪检测，对轻木叶片进行非靶向成分测定，得到代谢组原始数据；3数据挖掘与处理：利用Proteowizard的MSConvert软件将质谱下机原始数据转换成可读数据格式—mzXML；利用XCMS软件进行峰提取并进行质控，对提取到的物质利用CAMERA进行加和离子注释；利用metaX软件对代谢物进行鉴定；4植物激素的筛选鉴定与定量分析：对四个时期轻木叶片的代谢物鉴定结果进行多元统计分析，利用PLS-DA模型筛选鉴定到轻木叶片三种植物激素；色谱条件为：色谱柱为UPLCHSST3柱，规格2.1mm×100mm，1.8μm，流动相A为0.1％甲酸水溶液和5mmolL乙酸铵水溶液，流动相B以乙腈为流动相；洗脱梯度设置为如下：0min，B相比例：1％；1min，B相比例：1％；8min，B相比例：99％；10min，B相比例：99％；10.1min，B相比例：1％；12min，B相比例：1％；流速为0.5mLmin；进样注射量为2μL；质谱条件为：ESI离子源喷雾电压分别为3.8kV和-3.1kV，鞘气流速为45Arb，辅助气流速为15Arb，毛细管温度320℃，帘气25psi，扫描范围：70-1000mz，分辨率为70000，分步碰撞能量为20eV,40eV,60eV；步骤4利用PLS-DA模型Pvalue0.05且VIP1的方法筛选鉴定到三种植物激素；步骤4所述三种植物激素为水杨酸、脱落酸、茉莉酸。

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