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申请/专利权人:北京工商大学
摘要:本发明公开一种基于5‑ALA转录因子的微生物全细胞传感器及其构建方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明通过关键氨基酸位点的饱和诱变和正负交替筛选,创造性地将响应L‑天冬酰胺的AsnC转录因子转化为响应5‑ALA的转录因子,并且构建了5‑ALA响应荧光蛋白报告载体和微生物全细胞传感器,可对样品中5‑ALA进行定性和定量检测,并且可用于筛选生产5‑ALA的酶、代谢途径和细胞。
主权项:1.一种5-ALA特异性转录因子,其特征在于,所述5-ALA特异性转录因子是在响应L-天冬酰胺的AsnC转录因子基础上存在如下至少一种形式的氨基酸突变:1第103位氨基酸由甘氨酸突变为组氨酸;2第105位氨基酸由酪氨酸突变为丙氨酸;3第138位氨基酸由苏氨酸突变为谷氨酸;4第105位氨基酸由酪氨酸突变为脯氨酸;5第138位氨基酸由苏氨酸突变为谷氨酰胺;6第138位氨基酸由苏氨酸突变为丝氨酸;7第103位氨基酸由甘氨酸突变为亮氨酸;8第105位氨基酸由酪氨酸突变为半胱氨酸;9第103位氨基酸由甘氨酸突变为异亮氨酸;10第103位氨基酸由甘氨酸突变为丝氨酸;11第105位氨基酸由酪氨酸突变为组氨酸;12第105位氨基酸由酪氨酸突变为亮氨酸;13第105位氨基酸由酪氨酸突变为丝氨酸。
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权利要求:
百度查询: 北京工商大学 基于5-ALA转录因子的微生物全细胞传感器及其构建方法和应用
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