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一种产香叶基香叶醇的酿酒酵母工程菌株及其应用 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明涉及一种产香叶基香叶醇的酿酒酵母工程菌株及其应用,属于合成生物工程及基因工程技术领域。本发明以酿酒酵母为底盘细胞,通过过表达甲羟戊酸途径、融合表达外源香叶基香叶基焦磷酸合酶与磷酸水解酶、下调竞争途径、敲除YPL062W和YJL064W、上调磷酸戊糖途径、过表达乙酰辅酶A以及增加融合基因拷贝数,最终获得重组菌株YCP23,在优化的条件下,YCP23在5L发酵罐发酵150h实现了11.3gL的香叶基香叶醇产量。

主权项:1.一种重组菌,其特征在于,所述重组菌以酿酒酵母为底盘细胞,对底盘细胞进行如下A1-A6、B1、C1、D1、E1-E2、F1和G1-G2所示的改造:A1、过表达融合蛋白BTS1-ERG20、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶tHMG1和异戊烯焦磷酸异构酶IDI1;A2、过表达乙酰-乙酰辅酶A硫解酶ERG10、甲羟戊酸激酶ERG12和焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶ERG19;A3、过表达法尼基焦磷酸合酶ERG20和异戊烯焦磷酸异构酶IDI1;A4、过表达羟甲基戊二酰辅酶A合成酶ERG13、磷酸甲羟戊酸激酶ERG8和香叶基香叶基焦磷酸合酶BTS1;A5、敲除GAL80基因;A6、以GAL1启动子过表达羟甲基戊二酰辅酶A还原酶tHMG1编码基因;B1、过表达融合蛋白CrtE03M-DPP1;C1、将驱动ERG9基因的启动子替换为启动子ERG1;D1、敲除YPL062W和YJL064W基因;E1、过表达葡萄糖-6-磷酸脱氢酶ZWF1和磷酸葡萄糖酸脱氢酶GND1;E2、过表达转酮醇酶TKL1和转醛缩酶TAL1;F1、过表达乙酰辅酶A合酶SeACSL641P;G1、过表达至少1拷贝的融合蛋白crtE03M-ERG20编码基因;G2、过表达融合蛋白crtE03M-DPP1。

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