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生产鲎凝血因子FGβ'的菌株、制备方法和应用 

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申请/专利权人:科赫生物科技(北京)有限公司

摘要:本公开提供了一种生产鲎凝血因子FGβ'的菌株、制备方法和应用,该菌株共同表达了鲎凝血因子FGβ'和分子伴侣素CpkA;所述鲎凝血因子FGβ'是对获取到的鲎凝血因子FGβ删除如SEQIDNO:1所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:2所示带净正电荷的锚定肽获取到的。在本公开提供的技术方案中CpkA的羧基端带负电,而FGβ'相应地带有一段带正电的锚定肽。通过静电相互作用,CpkA和FGβ'结合力增强,因此CpkA可以更有效地帮助FGβ'折叠成正确的构象,从而提高其可溶性表达。

主权项:1.一种生产鲎凝血因子FGβ'的菌株,其特征在于:所述菌株共同表达了鲎凝血因子FGβ'和分子伴侣素CpkA;所述鲎凝血因子FGβ'是对获取到的鲎凝血因子FGβ删除如SEQIDNO:1所示的前导肽,并在N端添加如SEQIDNO:2所示带净正电荷的锚定肽获取到的;所述删除如SEQIDNO:1所示的前导肽后的鲎凝血因子FGβ编码基因序列如下:GGCATCAATGAAAAACATTGTGGTTTTCGTCCGGTGATTACCCGTATTATTGGTGGTGGTATTGCAACACCGCATAGCTGGCCGTGGATGGTTGGTATCTTTAAAGTTAATCCGCATCGTTTTCTGTGCGGTGGTAGCATTATTAACAAAGTTAGCGTTGTTACCGCAGCGCATTGTCTGGTTACCCAGTTTGGTAATCGTCAGAACTATAGCATTTTTGTTCGTGTTGGTGCCCACGATATTGATAATAGCGGCACCAATTATCAGGTGGATAAAGTTATTGTGCACCAGGGCTATAAACATCACAGCCACTATTATGATATTGGCCTGATTCTGCTGAGCAAACCGGTTGAATATAACGATAAAATTCAGCCGGTGTGTATCCCGGAATTTAACAAACCGCATGTGAACCTGAACAACATCAAAGTTGTTATTACCGGTTGGGGTGTGACCGGTAAAGCAACCGAAAAACGTAATGTTCTGCGTGAACTGGAACTGCCGGTTGTTACCAATGAACAGTGTAATAAAAGCTATCAGACCCTGCCGTTTAGCAAACTGAATCGTGGTATTACCAACGATATGATTTGTGCAGGTTTTCCGGAAGGTGGTAAAGATGCATGTCAGGGTGATAGCGGTGGTCCGCTGATGTATCAGAATCCGACCACCGGTCGTGTTAAAATTGTTGGTGTTGTTAGCTTTGGCTTTGAATGTGCACGTCCGAATTTTCCGGGTGTTTATACCCGTCTGAGCAGCTATGTTAATTGGCTGCAAGAAATTACCTTTGGTCAGAGCCTGGCAAGCCTGTTTGAAGTTGTTCCGATCTTTATACCGGAATAA。

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