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诱饵多核苷酸在单细胞多组学中的应用 

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申请/专利权人:贝克顿迪金森公司

摘要:本文公开的内容包括用于在降低噪声中使用诱饵寡核苷酸的系统、方法、组合物和试剂盒。在一些实施方案中,本文提供的诱饵寡核苷酸可以防止或减少细胞内靶结合试剂特异性寡核苷酸或蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸与非靶细胞内源性核酸的不合意的非特异性结合,并且因此减少本文提供的方法中的噪声,诸如例如,单细胞多组学分析。

主权项:1.一种用于检测细胞中蛋白质靶表达和核酸靶拷贝数的方法,所述方法包括:使各自包含多于一种蛋白质靶、核酸靶的拷贝和一种或更多种非靶核酸的多于一个细胞固定;使所述多于一个细胞透化;使所述多于一个细胞与包含能够与所述一种或更多种非靶核酸中的至少一种杂交的多于一种诱饵寡核苷酸的阻断试剂接触;使多于一种蛋白质靶结合试剂与所述多于一个细胞接触,其中所述多于一种蛋白质靶结合试剂中的每一种包含蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸,所述蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸包含用于所述蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸的独特蛋白质靶标识符,并且其中所述蛋白质靶结合试剂能够与所述多于一种蛋白质靶中的至少一种特异性结合;将与所述蛋白质靶结合试剂关联的多于一个细胞分区至多于一个分区,其中所述多于一个分区中的分区包含来自与所述蛋白质靶结合试剂关联的多于一个细胞的单细胞;在包含所述单细胞的分区中,使多于一种寡核苷酸条形码与所述核酸靶的拷贝和所述蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸接触进行杂交,其中所述寡核苷酸条形码各自包含第一分子标记;使与所述蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸杂交的所述多于一种寡核苷酸条形码延伸以产生多于一种条形码化蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸,所述多于一种条形码化蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸各自包含与所述独特蛋白质靶标识符序列的至少一部分互补的序列和所述第一分子标记;使与所述核酸靶的拷贝杂交的所述多于一种寡核苷酸条形码延伸以产生多于一种条形码化核酸分子,所述多于一种条形码化核酸分子各自包含与所述核酸靶的至少一部分互补的序列和所述第一分子标记;获得所述多于一种条形码化核酸分子或其产物的序列信息,以确定所述多于一个细胞中的一个或更多个中所述核酸靶的拷贝数;以及获得所述多于一种条形码化蛋白质靶结合试剂特异性寡核苷酸或其产物的序列信息以确定所述多于一个细胞中的一个或更多个中所述多于一种蛋白质靶中的至少一种蛋白质靶的存在。

全文数据:

权利要求:

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