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申请/专利权人：上海仁度生物科技股份有限公司

摘要：本发明公开一种前列腺癌的数字微液滴RNA扩增检测系统及PCA3联合ERG基因在该系统中的应用，属于肿瘤诊断技术领域。提供的前列腺癌的数字微液滴RNA扩增检测系统包括基于实时荧光核酸恒温扩增方法的分别特异性检测以下基因的试剂：PCA3、ERG及SPDEF，和数字PCR系统。本发明提供的数字微液滴RNA扩增检测系统相比于现有检测前列腺癌的试剂盒或其他产品使前列腺癌检测漏检率大大降低，并提高了前列腺癌的检测灵敏度和阴性预测值。

主权项：1.一种前列腺癌的数字微液滴RNA扩增检测系统，其特征在于，所述数字微液滴RNA扩增检测系统包括基于实时荧光核酸恒温扩增方法的分别特异性检测以下基因的试剂：PCA3、ERG和SPDEF基因，和用于对以上基因进行绝对定量的数字PCR系统；其中所述SPDEF基因作为检测内参基因；其中针对每一种基因的特异性检测试剂包括与该种基因对应的：1核酸提取液：其包含含有特异性捕获探针的固相支持物，所述捕获探针用于捕获基因序列；可选地，特异性检测以下基因的特异性捕获探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1-3所示：PCA3、ERG和SPDEF；进一步可选地，所述核酸提取液的组分包括：250-800mMHEPES、4-10％十二烷基硫酸锂、1-50μΜ所述的特异性捕获探针、50-500mgL磁珠；2扩增检测液：其包含第一引物、第二引物和靶标检测探针，其中所述第一引物与所述第一引物配合，用于扩增基因序列中的靶标序列，所述靶标检测探针与靶标的扩增产物RNA拷贝特异性结合；可选地，特异性检测以下基因的第一引物的核苷酸序列分别如SEQIDNO:4-6所示：PCA3、ERG和SPDEF；特异性检测以下基因的第二引物的核苷酸序列分别如SEQIDNO:7-9所示：PCA3、ERG和SPDEF；特异性检测以下基因的靶标检测探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO:10-12所示：PCA3、ERG和SPDEF，在所述靶标检测探针的核苷酸序列两端分别携带有荧光报告基团和淬灭基团；进一步可选地，所述扩增检测液的组分包括：10-50mMTris、5-40mMKCl、10-40mMMgCl2、1-20mMNTP、0.1-10mMdNTPs、1-10％PVP40、10-250pmolmL所述的第一引物、10-250pmolmL所述的第二引物、10-250pmolmL所述的靶标检测探针。

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百度查询： 上海仁度生物科技股份有限公司 前列腺癌的数字微液滴RNA扩增检测系统及PCA3联合ERG基因在该系统中的应用