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一种酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽及其制备方法 

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申请/专利权人:西北农林科技大学

摘要:本发明公开了酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽的制备方法,采用胰蛋白酶将牛乳酪蛋白酶解,酶解物经过大孔非极性树脂分离及脱盐,再经过半制备凝胶色谱仪纯化,冷冻干燥,即加工成酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽粉,经申请人进行的胰脂肪酶抑制功能试实验结果表明,制得的该酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽对胰脂肪酶活性具有较高的抑制率,酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽一级结构明确,分子量均小于3000,易于吸收利用。酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽对于促进人类健康以及其在减肥功能食品方面的应用将具有重要且长远的意义。

主权项:1.一种酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽的制备方法,其特征在于,具体按下列步骤进行:1牛乳酪蛋白的提取牛乳酪蛋白的提取是将鲜牛乳离心脱脂后,利用等电点沉淀法将牛乳沉淀后弃去上清液,所得沉淀洗涤后,即为粗酪蛋白;2酪蛋白酶解物的制备牛乳酪蛋白酶解液的制备是将粗酪蛋白用胰蛋白酶在规定的底物浓度、pH、温度和加酶量条件下水解规定时间后,灭酶,冷却,离心,上清液真空浓缩后得酶解浓缩物;所述的牛乳酪蛋白酶解物的制备方法是,称取适量的牛乳酪蛋白粗品,配置30gkg~60gkg的牛乳酪蛋白溶液,调节pH至7.5,95℃加热5min,冷却到50℃~70℃,加入300-500Ug的胰蛋白酶,用2molL的NaOH溶液使pH值保持恒定,酶解4.0h后,95℃灭酶10min,冷却到室温,10000g离心15min,取上清液在45~50℃,0.09MPa下浓缩,得牛乳酪蛋白酶解浓缩物;所述的胰脂肪酶抑制肽的一级结构为:SLKALEVPLAARLGVPFPKALVL,LLLAKVSLMLVTVLFPKALVL和TKVVLVQAPLKGFLLAKLVML,其分子量均在3000以下;3酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽脱盐及分离纯化将步骤2获得的乳酪蛋白酶解浓缩液,先通过大孔吸附树脂层析柱脱盐、再用超纯水洗脱,收集超纯水洗脱液,真空浓缩,再过凝胶色谱柱和半制备型高效液相色谱进行分离纯化,冷冻干燥,即得酪蛋白源胰脂肪酶抑制肽粉。

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权利要求:

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