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申请/专利权人:苏州欧福蛋业股份有限公司
摘要:本发明公开了一种鸡蛋清中溶菌酶提取制备方法,涉及溶菌酶提取技术领域,为解决现有的溶菌酶提取方法每次能制取的溶酶菌质量有限,且得到的溶酶菌存储使用较为不便的问题。包括以下步骤:步骤一:以蛋清为原材料,在5—10℃下,将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg724树脂中,搅拌吸附6h,在0—5℃静置过夜;步骤二:倾出上层蛋清,树脂离心甩干,用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白,然后将树脂装入柱内,用0.15molL、pH=6.5醋酸缓冲溶液约150L洗涤树脂,再用约600L的10%氯化钠溶液洗脱,收集洗脱液;步骤三:将洗脱液在制备装置上用盐酸溶液调pH至6.0,在调pH值的过程中不停的搅拌。
主权项:1.一种鸡蛋清中溶菌酶提取制备方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一:以蛋清为原材料,在5—10℃下,将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg724树脂中,搅拌吸附6h,在0—5℃静置过夜;步骤二:倾出上层蛋清,树脂离心甩干,用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白,然后将树脂装入柱内,用0.15molL、pH=6.5醋酸缓冲溶液约150L洗涤树脂,再用约600L的10%氯化钠溶液洗脱,收集洗脱液;步骤三:将洗脱液在制备装置上用盐酸溶液调pH至6.0,在调pH值的过程中不停的搅拌;步骤四:有少量的乳白色沉淀析出,然后加入15%聚丙烯酸,立即有白色沉淀析出,加至pH值为3.0为止,静置17个小时进行静析,得到粘附于底部的乳白色胶状物;步骤五:将前步得到的溶菌酶聚丙烯酸凝聚物,加入少量蒸馏水,并用0.5molL的碳酸钠,将其溶解,转移后,将pH值调到9.5,加入5%CaCl2溶液将溶菌酶聚丙烯酸解离,至无沉淀析出,然后过滤,得到澄清溶液;步骤六:将所得澄清溶液加入5%的NaCI溶液搅拌均匀,放入冰箱调温度为0℃,待有晶体析出后,用无水乙醇洗涤数次,置恒温培养箱中40℃条件下干燥称重;其中,制备装置包括制备平台1,制备平台1的下方设置有伸缩式液压缸2,制备平台1两侧外壁的支板上分别设置有洗涤池4和第二溶液桶6,制备平台1的内部方槽中设置有活动平台5,活动平台5的上端摆放有第一溶液桶3,制备平台1的上端设置有支架板8,支架板8的上端设置有顶台座9,支架板8与制备平台1和顶台座9一体成型设置,支架板8的顶部设置有驱动电机10。
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