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申请/专利权人：上海贯誉实业有限公司
摘要：本发明提供一种制备10kDa标准分子量蛋白质的方法，属于蛋白质工程技术领域，包括以下步骤：1、通过基因工程技术将设计的10kDa标准分子量蛋白质的基因片段连接至pET28a载体中，构建重组质粒pET28a‑10；2、通过热激法将重组质粒pET28a‑10转化至大肠杆菌BL21DE3感受态细胞中；3、将构建好的重组大肠杆菌接种至LB培养基中培养和诱导；4、取重组大肠杆菌菌液离心后获得的菌体进行超声破碎；5、使用Ni‑NTA柱对破碎后离心获得的上清液进行纯化；6、将洗脱后的10kDa标准分子量蛋白质溶液进行透析冻干获得蛋白冻干粉，本发明可以实现10kDa标准分子量蛋白质的快速分离纯化。可以解决10kDa标准分子量蛋白质表达量低、成本高、收获时间长等问题，获得高纯度的10kDa标准分子量蛋白质的冻干粉。
主权项：1.一种制备10kDa标准分子量蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：设计带有表达标签的10kDa标准分子量蛋白质的核酸序列，经过合成后连接至pET28a载体中，构建重组质粒pET28a-10；S2：将重组质粒pET28a-10转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中；S3：将构建好的重组大肠杆菌接种至LB培养基中培养和诱导；S4：提取培养和诱导完成后的重组大肠杆菌菌液进行离心，得到菌体，并对菌体进行细胞破碎；S5：对破碎后的液体进行离心获得上清液，对上清液进行纯化；S6：对洗脱后的10kDa标准分子量蛋白质溶液进行透析，冻干获得10kDa标准分子量蛋白质。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海贯誉实业有限公司 一种制备10kDa标准分子量蛋白质的方法
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