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申请/专利权人:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
摘要:本发明提供了一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗实验室生产方法。本发明涉及一种核酸疫苗实验室生产方法。本发明方法:一、核酸疫苗pIHNch‑G菌液培养;二、摇瓶扩大培养。本发明IHN核酸疫苗pIHNch‑G的实验室生产方法中,最佳碳源为酵母提取物,最佳氮源为胰蛋白胨,最佳缓冲盐为磷酸氢二钾和磷酸二氢钠,利用本发明的方法实现了IHN核酸疫苗pIHNch‑G的实验室生产,本发明的方法对传染性造血器官坏死病疫苗商品化具有重大意义。
主权项:1.一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗实验室生产方法,其特征在于虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗实验室生产方法按照以下步骤进行:一、核酸疫苗pIHNch-G菌液培养表达核酸疫苗质粒pIHNch-G的大肠杆菌划线含有0.1mgml氨苄青霉素抗性的LB固体培养基于35~39℃条件下倒置培养11~13h;挑取平板上的单菌落于含有0.1mgml氨苄青霉素抗性的LB液体培养基,在35~39℃、110~130rpm条件下培养10~14h,即得到核酸疫苗pIHNch-G菌液;二、摇瓶扩大培养步骤一得到的核酸疫苗pIHNch-G菌液按照1%的接种量接种到摇瓶培养基中,在35~39℃、110~130rpm条件下振荡培养8h,即实现了虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗实验室生产;所述每升摇瓶培养基由15g的胰蛋白胨、15g的酵母提取物、10g的磷酸氢二钾、10g的磷酸二氢钠和余量的水组成。
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