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申请/专利权人：南京合谷生命生物科技有限公司
摘要：本申请涉及微生物发酵生产技术领域，具体公开了一种N‑乙酰观蓝的双阶段发酵生产工艺，本申请的双阶段发酵生产工艺包括菌体增殖第一阶段发酵培养和N‑乙酰观蓝生物合成第二阶段发酵培养，相比利用静息全细胞催化谷氨酸生成N‑乙酰观蓝的方法，本申请通过双阶段发酵生产工艺维持中间代谢产物谷氨酰胺含量和N‑乙酰谷氨酰胺含量之间的摩尔比1：1平衡，有利于工程菌利用一分子谷氨酰胺和一分子N‑乙酰谷氨酰胺优先合成N‑乙酰观蓝，而不利于利用两分子谷氨酰胺合成观蓝，生产的N‑乙酰观蓝含量占比可达95％，而副产物观蓝的仅为5％，大幅降低了生产和纯化成本，成功实现了N‑乙酰观蓝的工业化生产。
主权项：1.一种N-乙酰观蓝的双阶段发酵生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：S1、将活化后的重组菌株种子发酵液接入含有葡萄糖的基础发酵培养基，在pH为7.0-7.5、温度为35-39℃的条件下进行第一阶段发酵培养，培养0-24h，获得第一阶段发酵液；S2、将第一阶段发酵液置于pH为6.0-6.5、温度为20-30℃、添加有合成酶诱导剂和降解酶抑制剂的条件下进行第二阶段发酵培养，培养24-72h，制得第二阶段发酵液，发酵至N-乙酰观蓝的产量停止增长，结束发酵；所述重组菌株为：向宿主菌导入观蓝合成酶编码基因、4’-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶编码基因、谷氨酰胺合成酶编码基因和N-乙酰谷氨酸合成酶编码基因构建得到。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京合谷生命生物科技有限公司 一种N-乙酰观蓝的双阶段发酵生产工艺
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