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申请/专利权人：江苏省血吸虫病防治研究所
摘要：本发明公开了一种日本血吸虫感染小鼠肝脏中单核细胞的分离方法，包括步骤：S1.对小鼠肝脏灌注去除肝脏内血液；S2.碎化肝脏组织，去除纤维结缔组织后，进行组合酶消化，得到混合液；所述组合酶为质量比为5:1的IV型胶原酶和DNaseI的PBS溶液；S3.去除混合液中团细胞及组织块后，与红细胞裂解液混合，除去残留红细胞；S4.离心除去肝实质，得沉淀细胞；S5.将沉淀细胞进行流式抗体孵育，用流式细胞分选仪分选抗体阳性细胞亚群，得到肝脏单核细胞。本发明通过特定种类的组合酶对日本血吸虫感染小鼠肝脏组织进行酶解消化，并结合流式细胞分选仪分选抗体阳性细胞亚群，得到高分离纯度和细胞活性的肝脏单核细胞。本方法操作简便，酶解成本低、利于推广。
主权项：1.一种日本血吸虫感染小鼠肝脏中单核细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.对小鼠肝脏灌注，去除肝脏内血液；S2.碎化肝脏组织，去除所述肝脏中纤维结缔组织后，对其进行组合酶消化；消化完成后，对组合酶灭活，得到混合液；所述消化所使用的组合酶为含有IV型胶原酶和DNaseI的PBS溶液，所述PBS溶液中IV型胶原酶和DNaseI的质量比为5:1；S3.去除混合液中团细胞及组织块后，与红细胞裂解液混合，除去残留在混合液中的红细胞；S4.去除红细胞后，重悬混合液中细胞，离心除去肝实质，得沉淀细胞；S5.将沉淀细胞与流式抗体稀释液混合，进行流式抗体孵育，孵育结束后使用流式细胞分选仪分选抗体阳性细胞亚群，得到肝脏单核细胞。
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百度查询： 江苏省血吸虫病防治研究所 一种日本血吸虫感染小鼠肝脏中单核细胞的分离方法
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