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申请/专利权人：广州中科飞豚生物科技有限责任公司
摘要：本发明涉及一种用于构建II型胶原蛋白人源化模型猪的方法及其应用，属于基因修饰技术领域。本发明首先提供了一种靶向编辑猪Ⅱ型胶原α1基因的CRISPR‑Cas9系统，利用CRISPRCas9介导的同源重组方法，将猪COL2A1基因原位替换成人COL2A1基因，并借助体细胞克隆技术构建II型胶原蛋白人源化模型猪，让猪产生与人体更类似的软骨组织，减轻移植后的免疫排斥反应，将有望从根本上解决人源软骨组织短缺的问题，对治疗关节软骨损伤具有重要意义，为关节软骨损伤的治疗提供了可供选择的、更好的移植材料。
主权项：1.一种靶向编辑猪Ⅱ型胶原α1基因的CRISPR-Cas9系统，其特征在于，所述靶向编辑猪Ⅱ型胶原α1基因的CRISPR-Cas9系统包括靶向猪Ⅱ型胶原α1基因的sgRNA载体和含有人COL2A1蛋白编码序列的同源打靶载体；所述靶向猪Ⅱ型胶原α1基因的sgRNA载体包含靶向猪Ⅱ型胶原α1基因的sgRNA序列以及编码Cas9核酸酶的核酸序列；所述sgRNA的靶位点的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述含有人COL2A1蛋白编码序列的同源打靶载体包含供体DNA，所述供体DNA为依次连接的上游同源臂、人COL2A1蛋白编码序列、BGHpolyA转录终止信号序列、嘌呤霉素抗性基因表达框和下游同源臂；所述上游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示；所述下游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州中科飞豚生物科技有限责任公司 一种用于构建II型胶原蛋白人源化模型猪的方法及其应用
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