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申请/专利权人:科赫生物科技(北京)有限公司
摘要:本公开提供了一种鲎凝血因子组合、反应体系、试剂盒及其应用,鲎凝血因子组合包括鲎凝血因子FGα',鲎凝血因子FGβ'和鲎凝血因子PCE';鲎凝血因子FGα'是对鲎凝血因子FGα删除如SEQIDNO:1所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:2所示锚定肽后,与分子伴侣素MA4386共表达获取到的;鲎凝血因子FGβ'是对鲎凝血因子FGβ删除如SEQIDNO:3所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:4所示锚定肽后,与分子伴侣素CpkA共表达获取到的;鲎凝血因子PCE'是基于对鲎凝血因子PCE删除如SEQIDNO:5所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:2所示的锚定肽后,与分子伴侣素MA4386共表达获取到的。本公开通过分子生物学技术有效增加鲎凝血因子的原核可溶性表达,减少海洋中鲎的使用量。
主权项:1.一种鲎凝血因子组合,其特征在于,所述鲎凝血因子组合包括鲎凝血因子FGα',鲎凝血因子FGβ'和鲎凝血因子PCE';所述鲎凝血因子FGα'是对鲎凝血因子FGα删除如SEQIDNO:1所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:2所示锚定肽后,与分子伴侣素MA4386共表达获取到的;所述鲎凝血因子FGβ'是对鲎凝血因子FGβ删除如SEQIDNO:3所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:4所示锚定肽后,与分子伴侣素CpkA共表达获取到的;所述鲎凝血因子PCE'是基于对鲎凝血因子PCE删除如SEQIDNO:5所示的前导肽,并添加如SEQIDNO:2所示的锚定肽后,与分子伴侣素MA4386共表达获取到的;所述鲎凝血因子FGα'的基因序列如下所示:ATGGGTGATGGTGATGATAGCCATGAACCGAAATGGCAGCTGGTTTGGAGTGATGAATTTACCAATGGTATTAGCAGCGATTGGGAATTTGAAATGGGTAATGGTCTGAATGGTTGGGGCAATAATGAACTGCAGTATTATCGTCGTGAAAATGCACAGGTTGAAGGTGGTAAACTGGTTATTACCGCAAAACGTGAAGATTACGATGGCTTCAAATATACCAGCGCACGTCTGAAAACCCAGTTTGATAAAAGCTGGAAATACGGCAAAATCGAAGCCAAAATGGCAATTCCGAGCTTTCGTGGTGTTTGGGTTATGTTTTGGATGAGCGGTGATAATACCAATTATGTTCGTTGGCCGAGCAGCGGTGAAATTGATTTTATTGAACATCGGAACACCAACAACGAAAAAGTTCGTGGCACCATTCATTGGAGCACACCGGATGGTGCACATGCACATCATAATCGTGAAAGCAATACCAACGGCATCGATTATCATATCTATAGCGTTGAATGGAACAGCAGCATCGTTAAATGGTTTGTGAATGGCAACCAGTACTTCGAGGTTAAAATTCAAGGTGGCGTTAATGGTAAAAGCGCCTTTCGTAATAAAGTGTTCGTGATTCTGAATATGGCCATTGGTGGTAATTGGCCTGGTTTTGATGTTGCAGATGAAGCATTTCCGGCAAAAATGTATATTGATTATGTGCGCGTTTATCAGGATGCAAGCACCAGCAGTCCGGTTGGTGATACCAGCCTGGATGGTTACTATTTTGTTCAGAATCGTCACAGCGAACTGTATCTGGATGTTACCGATGCCAGCAATGAAGATGGTGCATTTCTGCAGCAGTGGTCATATAGCGGTAATGAAAATCAGCAGTTTGATTTCGAACACCTGGAAAACAACGTGTACAAAATCACCAACAAAAAAAGCGGCAAATCCCTGGATGTTTATAACTTTGGCACCGAAAATGGTGTTCGTATTCAACAATGGTCATATGGTGGTGCACGTAACCAGCAGTTTACCGTTCAGAGCGTTGGTGATGGCTACTATAAAATCATTCCGCGTGGTAGCGGCAAACTGGTTGAAGTTGCCGATTTTTCAAAAGATGCCGGTGGTAAAATCCAGCAATGGTCAGATAATAATCAGCTGAGCGGTCAGTGGAAACTGATTAAAAGCAAAAGCTACAGCAAACTGATTCAGGCCGAAAGCTATTTTGATAGCAGCAAAGTTCAGCTGGAAGATACCAGTGATGTTGGTGGCGGTAAAAATGTGAAATGCGATAATGAAGGTGCATGGATGGCCTATAAAGATATTGATTTTCCGTCCAGCGGTAACTATCGTATTGAATATCGTGTTGCAAGCGAACGTGCCGGTGGCAAACTGAGCCTGGATCTGAATGCAGGTAGCATTGTTCTGGGTATGCTGGATGTGCCGAGTACCGGTGGTTGGCAGAAATGGACAACCATTAGCCATACCGTTAATGTTGATAGCGGCACCTATAATCTGGGTATTTATGTTCAGCGTGCCAGCTGGAATATTAACTGGATCAAAATTACGAAGATCCCCGAACAGAGCAATCTGAATCAGGGTCGTCGTAATAGTAAACTGATCCAAGCGGAATCCTATTTCAGCTATAGCGAGGTGCAGTTAGAAGATACACTGGATGTAGGTGGTGGCAAAAACGTTAAATGTGACAAAGAAGGTGCCTGGATGGCATACAAGGATATCGACTTTCCTAGCAGCGGTAGTTATCGCGTGGAATATCGCGTAGCATCAGAACGTGCAGGCGGAAAACTGTCACTGGATTTAAATGCCGGTTCAATTGTGCTGGGCATGTTAGATATTCCGTCAACCGGTGGCCTGCAAAAATGGACCACAATTTCACATATTGTGAATGTTGATCTGGGCACATACAACCTGGGCATCTATGTGCAGAAAGCAAGTTGGAACATTAATTGGATTCGCATCACCAAGGTGTAA;所述鲎凝血因子FGβ'的基因序列如下所示:ATGCGTGGTCGTCGTGGTGGTGCTAGCATGACTGGTGGACAGCAAATGGGTCGGGATTCAAGCTTGGGCATCAATGAAAAACATTGTGGTTTTCGTCCGGTGATTACCCGTATTATTGGTGGTGGTATTGCAACACCGCATAGCTGGCCGTGGATGGTTGGTATCTTTAAAGTTAATCCGCATCGTTTTCTGTGCGGTGGTAGCATTATTAACAAAGTTAGCGTTGTTACCGCAGCGCATTGTCTGGTTACCCAGTTTGGTAATCGTCAGAACTATAGCATTTTTGTTCGTGTTGGTGCCCACGATATTGATAATAGCGGCACCAATTATCAGGTGGATAAAGTTATTGTGCACCAGGGCTATAAACATCACAGCCACTATTATGATATTGGCCTGATTCTGCTGAGCAAACCGGTTGAATATAACGATAAAATTCAGCCGGTGTGTATCCCGGAATTTAACAAACCGCATGTGAACCTGAACAACATCAAAGTTGTTATTACCGGTTGGGGTGTGACCGGTAAAGCAACCGAAAAACGTAATGTTCTGCGTGAACTGGAACTGCCGGTTGTTACCAATGAACAGTGTAATAAAAGCTATCAGACCCTGCCGTTTAGCAAACTGAATCGTGGTATTACCAACGATATGATTTGTGCAGGTTTTCCGGAAGGTGGTAAAGATGCATGTCAGGGTGATAGCGGTGGTCCGCTGATGTATCAGAATCCGACCACCGGTCGTGTTAAAATTGTTGGTGTTGTTAGCTTTGGCTTTGAATGTGCACGTCCGAATTTTCCGGGTGTTTATACCCGTCTGAGCAGCTATGTTAATTGGCTGCAAGAAATTACCTTTGGTCAGAGCCTGGCAAGCCTGTTTGAAGTTGTTCCGATCTTTATACCGGAATAA;所述鲎凝血因子PCE'的基因序列如下所示:ATGGGTGATGGTGATGATCAGTTTGTTTTTCCGGATGAAGAGGAACTGTGTAGCAATCGTTTTACCGAAGAGGGCACCTGTAAAAATGTTCTGGATTGTCGTATTCTGCTGCAGAAAAACGATTACAACCTGCTGAAAGAAAGCATCTGTGGTTTTGAAGGTATTACCCCGAAAGTTTGTTGTCCGAAAAGCAGCCATGTTATTAGCAGCACCCAGGCACCGCCTGAAACCACCACCACCGAACGTCCGCCTAAACAAATTCCGCCTAATCTGCCGGAAGTTTGCGGTATTCATAATACCACCACAACGCGTATTATTGGTGGTCGTGAAGCACCGATTGGTGCATGGCCGTGGATGACCGCAGTTTATATCAAACAAGGTGGTATTCGTAGCGTTCAGTGTGGTGGTGCACTGGTTACCAATCGTCATGTGATTACCGCAAGCCATTGTGTTGTTAATAGCGCAGGCACCGATGTTATGCCTGCAGATGTTTTTAGCGTTCGTCTGGGTGAACATAATCTGTATAGCACCGATGATGATAGCAACCCGATTGATTTTGCAGTTACCAGCGTTAAACATCACGAACATTTTGTTCTGGCCACCTATCTGAATGATATTGCAATTCTGACCCTGAACGATACCGTTACCTTTACCGATCGTATTCGTCCGATTTGTCTGCCGTATCGTAAACTGCGTTATGATGATCTGGCAATGCGTAAACCGTTTATTACCGGTTGGGGCACCACCGCATTTAATGGTCCGAGCAGCGCAGTTCTGCGTGAAGTTCAGCTGCCGATTTGGGAACATGAAGCATGTCGTCAGGCATATGAAAAAGATCTGAATATCACCAACGTGTATATGTGTGCAGGTTTTGCAGATGGTGGTAAAGATGCATGTCAGGGTGATAGCGGTGGTCCGATGATGCTGCCGGTTAAAACCGGTGAATTTTATCTGATTGGCATTGTGAGCTTCGGCAAAAAATGTGCACTGCCTGGTTTTCCGGGTGTTTATACCAAAGTTACCGAATTCCTGGATTGGATTGCAGAACATATGGTGTAA。
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