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一种诱导胶原杂交肽保持单链胶原杂交能力的方法及应用 

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申请/专利权人:中山大学附属第五医院

摘要:本发明涉及蛋白质工程技术领域,公开了一种诱导胶原杂交肽保持单链构象与胶原杂交能力的方法及应用。该方法包括以下步骤:1将三螺旋多肽CHP溶解在变性剂溶液中,制得多肽溶液;2将所述多肽溶液加入水相缓冲溶液和或纯水进行稀释激活。本发明通过变性剂代替加热或者化学修饰CHP前体来抑制CHP的三螺旋化趋势,利用变性剂破坏CHP三螺旋间的氢键结构,使CHP变性解旋并保持单链构象,从而使CHP的三螺旋过程变得简单可控;并通过加入大量水相缓冲溶液和或纯水稀释变性剂,从而使稀释后的CHP溶液中残留极少的变性剂,使CHP恢复原来的折叠能力和胶原杂交能力。

主权项:1.一种诱导胶原杂交肽保持单链胶原杂交能力的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)将三螺旋的胶原杂交肽溶解在变性剂溶液中,制得多肽溶液;(2)将所述多肽溶液加入水相缓冲溶液和或纯水进行稀释激活;步骤(1)中,所述三螺旋的胶原杂交肽为GPOn的重复单链,所述n为9;步骤(1)中,所述变性剂溶液包括盐酸胍、异硫氰酸胍中的至少一种;步骤(1)中,所述多肽溶液的浓度为400μM;所述盐酸胍的浓度为8M;所述异硫氰酸胍的浓度为6M;步骤(2)中,所述水相缓冲溶液包括磷酸缓冲盐溶液;步骤(2)中,所述稀释的倍数为40倍。

全文数据:

权利要求:

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