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申请/专利权人：西南林业大学;云南植虫药生物科技有限公司

摘要：本发明涉及观赏植物组培技术领域，具体来说是一种蓝星花组培育苗的方法及应用，包括选取蓝星花顶端幼嫩枝条为外植体，清洁处理、消毒后接种至初代丛生芽诱导培养基中诱导出丛生芽，后转接至继代增殖培养基中获得更多的丛生芽，丛生芽最后接种于生根培养基中形成生根苗。本发明采用酒精、双氧水浸泡和升汞溶液消毒，较现有的消毒技术效果更佳，其主要是通过采用常规的酒精和升汞的同时，在中间环节添加了一定浓度的双氧水进行消毒，同时配合不同升汞浓度以及采用适宜的消毒时间方式，使外植体损伤降到最低，而有效的降低污染率，使得初代丛生芽诱导率可高达80%以上。

主权项：1.蓝星花组培育苗方法，其特征在于，步骤包括：（1）外植体选择与清洁：选择顶端幼嫩枝条，使用多菌灵50%粉剂500倍液浸泡24～36h后，用清水洗净；（2）外植体消毒：先用75%酒精消毒20～30s、无菌水涮洗1～3次，后用0.2%双氧水浸泡消毒8～10h、无菌水涮洗3～5次，再用0.02%升汞消毒15～17min、无菌水涮洗7～8次，最后使用0.05%升汞消毒4～5min、无菌水涮洗2～3次；（3）初代丛生芽诱导：消毒的外植体接种于初代丛生芽诱导培养基中，置于温度25±2℃，每日照光12h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养50～60天；所述初代丛生芽诱导培养基配方为：MS培养基+2,4-D0.01～0.02mgL+NAA0.02～0.04mgL+ZT0.3～0.4mgL+2-ip0.1～0.3mgL；（4）继代丛生芽增殖：初代诱导丛生芽切成单芽接种于继代丛生芽增殖培养基中，置于温度25±2℃，每日照光12h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养30～35天；所述继代丛生芽增殖培养基配方为：改良MS培养基+NAA0.02～0.04mgL+TDZ0.5～0.7mgL+BR0.01～0.04mgL；所述改良MS培养基配方为：硫酸镁浓度为1.04gL，磷酸二氢钾浓度为0.47gL，氯化钙浓度为0.10gL，糖浓度为65gL，pH调至5.2，其余元素不变；（5）丛生芽生根：继代丛生芽切成单芽接种于生根培养基中，置于温度25±2℃，每日照光14h，光强2000～3000lx的光暗交替下培养20～25天；所述生根培养基配方为：改良B5培养基+IAA0.5～0.6mgL+NAA0.2～0.3mgL+椰汁50～60mlL+活性炭0.2～0.3mgL；所述改良B5培养基配方为：硫酸镁浓度为1.04gL，磷酸二氢钠浓度为0.30gL，氯化钙浓度为0.07gL，糖浓度为40gL，pH调至5.2，其余元素不变。

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