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申请/专利权人：陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司
摘要：本发明属于干细胞制备和运输技术领域，具体涉及一种间充质干细胞球的工业化制备和运输方法。制备方法包括以下步骤：将间充质干细胞单细胞悬液、泊洛沙姆P407溶液、泊洛沙姆P188溶液和复合液混匀，得到单细胞温敏水凝胶，液相状态下将单细胞温敏水凝胶铺在培养容器底部，待单细胞温敏水凝胶分布均匀后，升温使其凝固，然后加入生理盐水、PBS、无血清培养基或者条件培养基覆盖所述单细胞温敏水凝胶；培养至干细胞球形成。本发明极大地降低了干细胞球的制备难度和成本，步骤容易操作，不需要特殊处理的培养器皿，运输条件要求低，对细胞损耗小，更便于间充质干细胞的临床应用推广，为干细胞球相关药物制剂的开发提供了基础条件。
主权项：1.一种间充质干细胞球的工业化制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1对离体的脐带来源间充质干细胞分离传代培养，收集P3～P10代间充质干细胞，一部分间充质干细胞重悬制成单细胞悬液；另一部分间充质干细胞种于细胞工厂，培养至细胞融合度达到80-90％，更换新鲜的不含抗生素的无血清培养基，继续培养2～3d后收集细胞培养上清，弃去沉淀杂质，收集上层液体后过滤除菌，即得条件培养基；2将单细胞悬液、泊洛沙姆P407溶液、泊洛沙姆P188溶液和复合液混合均匀，得到单细胞温敏水凝胶，单细胞温敏水凝胶中，单细胞终浓度3-6×106ml，泊洛沙姆P407质量百分比浓度12％-20％，泊洛沙姆P188质量百分比浓度0％-10％，复合液质量百分比浓度0％-10％，所述复合液含有透明质酸、胶原、海藻酸钠、甘油、丙二醇、壳聚糖中的一种或多种；3液相状态下将单细胞温敏水凝胶铺在培养容器底部，待单细胞温敏水凝胶分布均匀后，升温使其凝固，然后加入生理盐水、PBS、无血清培养基或者所述条件培养基覆盖所述单细胞温敏水凝胶，培养直至干细胞球形成。
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权利要求：
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