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一种高产虾青素的工程菌及其构建方法与应用 

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申请/专利权人:杭州精构生物科技有限责任公司

摘要:本发明涉及生物工程领域,特别是涉及一种高产虾青素的工程菌及其构建方法与应用。本发明以野生型解脂耶氏酵母出发,通过非同源重组策略引入了carB、carRP、crtZ和crBKT四个基因,进一步过表达甲羟戊酸途径MVA途径中的关键酶编码基因提高了虾青素的产量,实现了天然产物虾青素的高效生产。同时本发明提供的重组解脂耶氏酵母使用铜离子诱导表达启动子MT‑2控制β‑胡萝卜素酮化酶crBKT基因的表达,使其跟β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ保持时空差异表达,在胞内玉米黄质素高浓度积累时,加铜离子诱导β‑胡萝卜素酮化酶crBKT基因的表达,降低中间代谢副产物的生产,促进虾青素的高效生产。

主权项:1.一种高产虾青素的工程菌,其特征在于,包括以下步骤:所述工程菌的初始菌株为解脂耶氏酵母菌,导入八氢番茄红素脱氢酶基因carB、八氢番茄红素合成酶番茄红素环化酶基因carRP、β-胡萝卜素酮化酶基因crBKT和β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ的表达盒,同时过表达HMG-CoA还原酶编码基因HMG1和GGPP合酶编码基因GGS1,得到所述工程菌。所述八氢番茄红素脱氢酶基因carB的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;所述八氢番茄红素合成酶番茄红素环化酶基因carRP的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;所述β-胡萝卜素酮化酶基因crBKT的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;所述β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。

全文数据:

权利要求:

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