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一种具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的霍山石斛蛋白PPB3-Ⅱ及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:皖西学院

摘要:本发明公开了一种具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的霍山石斛蛋白PPB3‑Ⅱ及其制备方法和应用,属于生物医药领域。以α‑葡萄糖苷酶抑制活性为指示进行活性追踪,采用硫酸铵沉淀、超滤分离、DEAE阴离子交换层析和凝胶层析对霍山石斛蛋白进行分离纯化,最终得到霍山石斛蛋白PPB3‑Ⅱ。采用HPLC检验其纯度,采用LC‑MSMS方法结合NCBI数据库检索,鉴定出霍山石斛PPB3‑Ⅱ中的三个蛋白。机制研究表明,PPB3‑Ⅱ对α‑葡萄糖苷酶的抑制类型是一种非竞争与反竞争性的混合型抑制。PPB3‑Ⅱ动态猝灭α‑葡萄糖苷酶的荧光。有益效果:本发明的PPB3‑Ⅱ蛋白具有安全、高效等优点,可用于降血糖药物或食品等方面的开发利用。

主权项:1.一种霍山石斛蛋白PPB3-Ⅱ的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1采用硫酸铵沉淀法从霍山石斛中提取霍山石斛总蛋白DHPP;2对DHPP进行超滤离心,获得不同分子量段的组分,根据分子量段从大到小分别命名为PPA至PPE组分,选择PPB10-30kDa组分;3采用DEAE纤维素阴离子交换层析法对PPB组分进行分离,根据洗脱液浓度及体积由小到大对应的出峰情况,分别命名为PPB1至PPB5组分,选择PPB3组分;4采用葡聚糖凝胶SephadexG-75层析法对PPB3组分进行分离,根据洗脱液浓度及体积由小到大对应的出峰情况,分别命名为组分PPB3-Ⅰ至PPB3-Ⅲ组分;选择PPB3-Ⅱ组分,即得。

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